第三章-基因工程制药 1.ppt

3、流加式操作 又称补料-分批式操作，指在分批操方式的基础上，连续不断补充新培养基，但不取出培养基，整个发酵体积与分批操作相比是不断增加的。 4、连续式操作 指菌体和培养液一起装入发酵罐，在菌体培养过程中，不断补充新培养基，同时取出培养液和菌体在内的发酵液，发酵体积和菌体浓度维持不变，使菌体处在稳定的生长条件下 二、基因工程菌的发酵条件 应用基因工程技术生产药物，必须构建一个特定的目的基因无性繁殖体系，即构建基因工程菌株。与传统微生物培养不同，基因工程菌培养的难题是如何维持质粒的稳定性，发酵工艺的控制对表达至关重要。 不同的发酵条件会影响基因工程菌的代谢途径，对分离纯化也有影响，所以必须充分考虑影响外源基因表达的各种因素。 基因工程菌的发酵工艺流程 基因工程菌→摇瓶培养→初步确定工程菌的生长条件→发酵罐放大培养→确定最佳工艺参数 基因工程菌的培养过程主要包括： （1）通过摇瓶操作了解工程菌生长的基础条件，如温度、pH、培养基各种组分以及碳氮比，分析表达产物的合成、积累对受体细胞的影响； （2）通过培养罐操作确定培养参数和控制的方案以及顺序。 1、基因工程发酵菌的培养基组成 1）碳源 是第一营养要素，为正常生理活动提供能量来源，也为细胞物质和代谢产物的合成提供碳骨架。 基因工程菌可利用的碳源有糖类、有机酸、脂类和蛋白质，常用碳源有