毕业论文设计《732-型阳离子交换树脂提取溶菌酶方法初探》.docVIP

PAGE PAGE 1  2 0 1 1届本科毕业生毕业论文 题目：732-型阳离子交换树脂提取溶菌酶方法初探 作者姓名： 指导教师： （讲师） 学科专业： 生物技术 院 系: 生命科学与技术学院 提交日期： 2011-06-02 732-型阳离子交换树脂提取溶菌酶方法初探 （陇东学院生命科学与技术学院07生物技术班 甘肃 庆阳 745000） 摘要 该实验首先通过等电点沉淀法原理，调PH4.6使蛋清中杂蛋白沉淀下来，离心过滤对溶菌酶进行初步分离。提纯后的样品通过绘制标准曲线测定其蛋白浓度，随着纯化的进行，样品中溶菌酶含量不断增加。利用分光光度仪测定吸光值并绘制曲线，根据酶活定义，通过计算发现利用732型阳离子交换树脂提纯倍数可达到590，酶活保留原酶活的41%。再经SDS电泳分析表明离子交换层析纯化后的样品纯度较高，且条带清晰，能够达到预期的目的。 关键词 蛋清 溶菌酶 阳离子交换层析 电泳 Study on the Extraction of Lysozyme by 732 - type of the cationic exchange of the resin in Egg-white Lilongfeng1 Hepeng1 Liugang1 Liuxiuli2 (Electrial Engineering College ,Longdong University,Qingyang 745000,Gansu,China) Abstract The experiments adopt wait a bit of the sedimentaryis of principle, be transferred to a PH4.6, the filter is desire for the eggs out truffles are an enzyme in the preliminary from impurities. The standard through the drawn to determine the whites, the concentration of purification, as the samples are virus concentration kept increasing, the use of a spectrophotometer apparatus to measure a light, to draw curves based on a definition of work, 732 type of the cationic exchange resin purified multiple 590 enzymes can be achieved, the enzymes to keep alive the enzyme 41%. To the sds - page electrophoresis analysis indicates the purity of the purification, higher, and capable of achieving the intended purpose. Key Words Eggs clear Are bacteria enzymes The cations present exchange floor and Electrophoresis 1引言 在环境污染日趋严重，大力倡导绿色食品的今天，溶菌酶作为一种天然蛋白，能在胃肠道内作为营养物质被消化吸收，且对人体无害是一种安全性很高的食品保鲜剂、营养保健品、药品，因为它可以水解细菌细胞壁的β-1，4糖苷键，从而破坏肽聚糖支架而得名[1]。溶菌酶作为一种碱性球蛋白，其化学性质非常稳定，PH在1.2-11.3范围内剧烈变化时，其结构几乎无改变。耐热性极高，100OC处理1min任然保持原酶活性。溶菌酶对变性剂相对不敏感，但吡啶、十二烷基磺酸钠对酶有抑制作用，氧化剂能使酶钝化。溶菌酶在医药上用途非常广泛，它可与血液中的病毒结合防治流感有利于脓汁痰液的排出，能清除坏死组织，增强抗生素的药效，临床上还应用于五官科多种粘膜疾病。此外，日本还用固定化溶菌酶技术处理废水取得了很好效果[2]。正因为溶菌酶日益具新的功能，人们对它的研究也经久不衰。关于溶菌酶的分离和纯化方法主要有结晶法,离子交换法,和色谱法等。亲和色谱法分离溶菌酶也是一种有效手段[3]，由于其分离具有