毕业论文设计《CUC3基因RNA干扰载体对烟草的转化及鉴定》.docVIP

PAGE l 毕业论文（设计） 题目：CUC3基因RNA干扰载体 对烟草的转化及鉴定 院 （系） 化学与环境工程学院 专 业 生物工程 学生姓名 xxx 成 绩 指导教师 xxx （职称） 教 授 指导教师 xxx （职称） 研究员 年6月 摘 要 采用叶盘法通过已导入了构建好的表达载体的根癌农杆菌，对野生型烟草叶片进行转化。烟草叶片在分化培养基MS + 0.1mg/L NAA + 1.0mg/L 6-BA + 50mg/L Hyg + 500mg/L Cb上4周后分化出芽；在生根培养基MS +0.2 mg/L IBA +250mg/L Cb上，1-2周后形成根；叶片β-葡萄糖甘酸酶（GUS）组织化学染色，阳性率为75%；通过PCR 检测潮霉素磷酸转移酶（HPT）基因的DNA序列，获得14个阳性株系。在烟草转化阳性株系中获得了2种表型：叶片融合和叶片缺失。 关键词∶根癌农杆菌；GUS组织化学染色; 聚合酶链式反应( PCR) Abstract Agrobacterium with expression vector transformed the leaves of Nicotiana tabacum. Regenerated shoots were formed in 4 weeks when the leaves of N. tabacum cultured on shoot-inducing medium MS medium supplemented with 0.1mg/L NAA, 1.0mg/L 6-BA, 50mg/L Hyg and 500mg/L Cb. Shoots rooted on the root induction medium MS medium supplemented with 0.2mg/L IBA and 250mg/L Cb in 1-2 weeks. β-glucuronidase(GUS) histochemical assay indicated that the GUS positive rate was 75%. PCR analysis of gene Hygromycin phosphotransferase(HPT) gene indicated that there were 14 positive lines. There were 2 distinct phenotypes in the positive lines: leaf fusion and leaf incompleteness. Keywords：Agrobacterium tumefacien; GUS staining; polymerase chain reaction (PCR) 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc201848976 第一章 前言 PAGEREF _Toc201848976 \h 1 HYPERLINK \l _Toc201848977 1.1 烟草概述 PAGEREF _Toc201848977 \h 1 HYPERLINK \l _Toc201848978 1.1.1 烟草的生物学研究 PAGEREF _Toc201848978 \h 1 HYPERLINK \l _Toc201848979 1.1.2 烟草的遗传转化研究进展 PAGEREF _Toc201848979 \h 1 HYPERLINK \l _Toc201848980 1.2根癌农杆菌转化体系 PAGEREF _Toc201848980 \h 2 HYPERLINK \l _Toc201848981 1.2.1根癌农杆菌介导的分子机制 PAGEREF _Toc201848981 \h 3 HYPERLINK \l _Toc201848982 1.2.2 用根癌农杆菌进行基因转化的植物 PAGEREF _Toc201848982 \h 3 HYPERLINK \l _Toc201848983 1.3 RNA干扰 PAGEREF _Toc201848983 \h 4 HYPERLINK \l _Toc201848984 1.3.1 RNA干扰的定义 PAGEREF _Toc201848984 \h 4 HYPERLINK \l _Toc2