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二、gcNODs基因的克隆与表达分析 7. gcNODs基因在肽聚糖刺激下的诱导型表达 * * * * * * 二、gcNODs基因的克隆与表达分析 * * * * * 8. gcNODs基因在脂多糖刺激下的诱导型表达 * * * * * * * 二、gcNODs基因的克隆与表达分析 * * * * * * 9. gcNODs基因在Poly I:C刺激下的诱导型表达 * * * * * * * 二、gcNODs基因的克隆与表达分析 10. gcNODs基因在呼肠孤病毒感染下的诱导型表达 * * * * * * * * * * * * * * * * * 二、gcNODs基因的克隆与表达分析 11. gcNOD1基因重组蛋白的表达与纯化 97.4 66.2 43.0 31.0 20.1 14.4 * 二、gcNODs基因的克隆与表达分析 11. gcNOD1基因重组蛋白的表达与纯化 M 1 2 3 4 5 6 7 8 97.4 66.2 43.0 31.0 20.1 * 二、gcNODs基因的克隆与表达分析 12. gcNOD1蛋白的免疫组化 A B C D E F * 二、gcNODs基因的克隆与表达分析 13.小结 （1）首次从鱼类中克隆了NOD1和NOD2基因，氨基酸的排列、基因组结构以及内含子相位的分析都显示了NOD1和NOD2在进化上具有很强的保守性； （2）荧光定量分析显示草鱼的NOD1和NOD2基因呈广泛的组成性表达分布，在所检测的组织中都可以检测到表达； * 二、gcNODs基因的克隆与表达分析 （3）来自革兰氏阳性菌的PGN对草鱼NOD1的表达在大多数组织中没有显著的作用； （4）在LPS刺激下，gcNOD1的诱导表达特征与gcNOD2相似； （5）polyI:C和病毒感染也能诱导gcNOD1和gcNOD2的表达。 * 三、gc IFN-γrel基因的克隆与表达分析 1. gcIFN-γrel基因的分子特点 IFN-γrel基因的cDNA包含861bp， 其中5?- UTR长39 bp，ORF长504bp编码167个氨基酸，3?- UTR长316bp。 3?- UTR富含AT（75.2%），一个潜在的多腺苷酸加尾信号（AATAAA)位于poly[A]尾上游13bp。 * 三、gc IFN-γrel基因的克隆与表达分析 AAATTCGCTTGGTTCACAGCACCAAAACACAAACACAAAGAATGGATTCTTGGCTCAACA M D S W L N TGATGCTGCTGTGTGGACTTCTGTTAATAGCATCTCTTCAGACAACCAACGCTTTCAGAT M M L L C G L L L I A S L Q T T N A F R TTCGACGGTCCAAAAGCGAGATGACCCATTTGGAGACAAATATCCACTCTCTGCAAGAAC F R R S K S E M T H L E T N I H S L Q E ATTATgtaagtgatgtctactatcatgaacttcagcagggggtttgaaagcaactcttgt H Y ctgtgttaacaagatgaatcacttcaagtcctactcatatctgtatgttatagtttggtc ttgcggctaatattagcaagaagagacctattgcacaataaatttcacgaaactttgttc ttagattaggagttaagattcaccagagatgcacattcattcataacgtttgctgttttt tgcccgctttctttagAAAACACGTGGCACAGAATGGGTTTCAAAGTCTGTTTTTGTTCC K T R G T E W V S K S V F V P TCATCTGAACCAGCTGAATgtaagtttttactgtgcaaaatgctaaaatattaaaatgca H L N Q L N actgaatgatatatatgcctctatatatgtatcatgctaataatacttgtttctcttagT CCAAGGCTTCCTGCACTTGTCAGGCGCTGTTGCTTGAAAGAATGCTGAACATCTACGAAG S K