实验-出凝血检查-精选版.ppt

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实验-出凝血检查-精选版.ppt

报告方式: PT:X.Xs,正常人血浆X.Xs PTR:X.X INR:X.X * 注意事项: 试管应洁净干燥,抽血应“一针见血”,抗凝剂与血液比例(1:9)应准确。取血后4h内完成测定。 钙凝血活酶必须标有国际敏感指数(ISI),ISI越接近于1.0越敏感。 标本测定前应先测定正常人混合血浆,其PT值在允许范围内才能测定样本。 * 评价: 血浆凝血酶原是一种筛选试验,是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原和凝血因子V、VII、X的缺陷或相应抑制物的存在,也用于监测口服抗凝治疗时引起的凝血酶原和因子VII、X水平的下降。 * 实质: 对检测样本(血浆)中存在凝血激酶时的再钙化反应,这种过程包括了因子VIIa、组织因子、磷脂、钙离子对凝血酶原的活化,凝血酶裂解纤维蛋白原和纤维蛋白单体的聚集交联。 * 活化部分凝血活酶时间测定 APTT * 原理: 用白陶土激活XII因子、脑磷脂代替血小板磷脂,测定乏血小板血浆加入Ca2++后凝固所需时间。 * 步骤: 采血 空腹静脉血1.8ml+0.2ml 109mmol/L枸橼酸钠混匀。 分离血浆 3000r/min离心10分钟分离血浆。 溶解试剂 临用时加1ml蒸馏水,室温静置15min以上,混匀后使用。 预温活化 0.1ml血浆+APTT试剂0.1ml混匀,37℃准确孵育3min(其间轻轻摇动数次) 加钙计时 加入0.1ml 25mmol/L CaCl2混匀并立即开动秒表计时,20s后,观察混合液流动状态。 * 正常参考值:一般在33.68~40.32s(不同仪器和试剂所测之参考值有差别) 报告方式: APTT:XX.Xs,正常人血浆:XX.Xs * 注意事项: 采血时穿刺尽量一针见血,不要淤血和气泡,采血后立即与抗凝剂混合,尽快送往实验室。使用枸橼酸盐(抗凝)血浆 如果不能立即测试,应尽快分离血浆,盛血浆的容器加塞,防止PH值改变 血浆在2~8℃下保留7天 钙凝血活酶必须标有国际敏感指数(ISI),ISI越接近于1.0越敏感。 * 临床意义: APTT延长: 表明有内源性凝血途径有关因子的缺陷(血友病)和纤维蛋白原缺乏。 纤维活力增加,如继发性,原发性纤溶以及血循环中有纤维蛋白(原)降解产物(FDP)。 血循环中有抗凝物质。       * APTT缩短:    高凝状态,如DIC的高凝期,促凝物质进入血液以及凝血因子的活性增高等。 * 评价: APTT和PT同时检测是目前二期止血缺陷的主要筛选试验组合。 * 在有临床出血症状的前提下: APTT PT 提示 正常 延长 因子VII的缺陷 延长 正常 因子VIII、IX、XI缺陷 正常 正常 怀疑因子XIII缺陷可能 延长 延长 除因子II、V、I、X缺陷 外,主要是异常抗凝物质 的增多 * 血浆复钙时间 RT * 原理: 在去钙离子的抗凝血浆中,重新加入适量的钙后,血浆发生凝固。 * 步骤: 0.2ml 0.1mol/L草酸钠+静脉血1.8ml混匀,离心分离血浆。 0.1ml血浆置37℃水浴中,+0.025mol/L CaCl2 0.1ml,立即开动秒表记录时间。 * 正常参考值: 2.08±0.49分(2.18~3.77分钟) * 注意事项: 不要溶血,否则时间缩短 CaCl2新鲜配制 分离血浆以1000转/分为宜,高速离心可使大量血小板下沉而导致复钙时间延长。 * 8.抗凝剂在血标本的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度,进而影响试验结果,因此应根据患者红细胞比例(Hct)状况随时调整抗凝剂用量。 * (二)应用试剂应注意 的问题 * 1.组织凝血活酶工作制剂的国际敏感指数(ISI),为了使不同敏感性的组织凝血活酶在检测PT中能得到同样的结果,必须要制定一个共同的敏感性指标。 * 2.凝血活酶和部分活化凝血活酶的使用步骤必须严格按照说明书进行。通常在使用前必须充分混匀试剂,以使微粒重新均匀悬浮于液体中。 * 3.试剂准备过程中应该使用去离子水。 * 4.正常对照血浆通常将多份健康人血标本混在一起,以弥补个体误差。 * (三)使用实验器材应注意的问题 * 1. 玻璃器皿的要求:贮存和测试时应选用干净、没有划痕的试管。 * 2. 温度的要求:人工测定终点法要求水浴箱的温度必须保持在(37±1)℃,并且周围照明设备要好,便于读取终点。 * (四)实验操作应注意的问题 * 1.

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