《第二章_微生物常规鉴定技术(1)》课件.pptVIP

华南农业大学　食品学院　王丽 第二章 微生物常规鉴定技术 食品微生物检验常用的仪器 培养基和实验室基本操作技术 生物安全实验室 生化实验和血清学实验 第一节食品微生物检验常用仪器 显微镜 冰箱 超净工作台、杀菌锅 离心机 水浴锅、培养箱 烘箱或干燥箱 匀质器 （一）显微镜 （二）、培养箱 智能隔水恒温培养箱 隔水培养箱 电热培养箱 生化培养箱 电热恒温培养箱 2、生化培养箱 培养箱的配置和使用 配置：22（℃）、30（℃）、37（℃）培养箱各一个 使用注意事项： (1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。 (2)内放一杯水，以保持湿度。 (3)培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。 (4)每月消毒一次，先用3%的来苏尔液涂布消毒，再用清水擦净。 (5)不得当烘箱使用。 （三）匀质器 （四）、超净工作台 三大类 型： 侧流式、直流式和外流式 超净台的使用和注意事项 1、使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射时间40~60分钟； 2、使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦拭，请用含水棉布檫拭； 3、请保持超净台整洁，不要堆积杂物； 4、使用完毕，勿忘关闭煤气开关或酒精灯； 5、请做好使用记录。 6、如遇故障，除记录在册外，还应及时与有关人员联系，尽早排除故障。 7、学期开始做无菌试验一次，以保证净化台正常使用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。 （五）、离心机 离心机的类型： 普通离心机 高速离心机 超速离心机 （六）、灭菌器 干热灭菌器 湿热灭菌器 1、电烘箱（干燥箱） 用途： 用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。 玻璃器皿等物的灭菌，温度160~165℃，灭菌 2小时。 玻璃器材的干热灭菌方法 (1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。 (2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。 (3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。 (4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在160℃—165℃保持2小时即可。 (5)待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取出玻璃器皿。 2、高压灭菌锅 用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。 种类：手提式、立式、卧式杀菌锅 手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法 （1）、关好排水阀门放入清水至标度为止。 （2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。 （3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的空气，再关闭活门。 （4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。 （5）、稍微打开一点排气活门，使锅内蒸气缓慢排除。 （6）、当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。 （7）、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。 思考题 干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何? 电热烘箱和高压锅如何操作? 各有哪些使用注意事项? 一、培养基中的主要成分及其作用 N源、C源、无机盐、生长因子、水 1、常用的N源物质 蛋白胨 牛肉膏 肉浸汁 酵母膏 2、糖、醇类物质 单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖　 双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖 多糖：淀粉、纤维素、菊糖 醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油 3、凝固剂 琼脂、明胶、血清等 要求：清一色、杂质少 4、抑制剂 1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率 2、种类： 盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等 染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红 胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐 抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素 5、指示剂 作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含氮化合物，产酸产碱的能力。 常用的指示剂： 酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等 二、培养基的类型 在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的任何营养基质，都叫做培养基(Media)。由于各类微生物对营养的要求不同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的种类很多。我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基划分为若干类型。 （一）、根据培养基的物理状态来区分 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 1、液体培养基 主要用于增菌培养、鉴别性培养 2、固体培养基 用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等 3、半固体培养基 观察微生物的动力，有时用来保藏菌种。 （二）、根据培养基的用途来区分 增殖培养基 选择培养基 鉴别培养