化妆品中来源于禁用偶氮染料的氨基联苯及其盐的测定液相色谱—串.DOC

PAGE 4 - - 化妆品中4-氨基联苯及其盐的检测方法 （征求意见稿） 适用范围 本方法规定了化妆品中4-氨基联苯及其盐的液相色谱/串联质谱测定方法。 本方法适用于化妆品中4-氨基联苯及其盐的测定，其检测限为1ng/g，定量限为3.3 ng/g。 方法提要 样品中禁用芳香胺4-氨基联苯及其盐，通过超声提取，液液萃取及固相萃取小柱净化并浓缩后，用适当的有机溶剂定容，经液相色谱/串联质谱测定，以内标法定量。 试剂与标准物质 甲醇：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 甲酸：色谱纯。 正己烷：分析纯 乙醚：分析纯。 饱和氯化钠溶液。 HLB固相萃取小柱或相当者：500mg，6mL。 4-氨基联苯：CAS 92-67-1，纯度＞99%。 4-氨基联苯-D9：CAS 344298-96-0，纯度＞99%。 4-氨基联苯标准贮备液（1000ug/mL）：准确称取标准物质10.0mg，用甲醇溶解,稀释，定容至10mL，于-18℃下保存。 4-氨基联苯标准工作溶液：分别取（3.10）标准贮备液，用甲醇稀释定容，制成浓度为1000ng/mL的标准溶液，于-18℃下保存。临用时用50%甲醇水溶液稀释成500ng/mL、200ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、20ng/mL、10ng/mL。 4-氨基联苯-D9 内标标准溶液：用50%甲醇稀释内标标准品溶液，得到100 ng/mL 4-氨基联苯-D9内标溶液。 分别从4-氨基联苯标准工作溶液（3.11）中分别吸取0.5mL溶液与0.5mL 100 ng/mL内标溶液（3.12）混合，制得内标4-氨基联苯-D9浓度为50ng/mL，4-氨基联苯分别为250 ng/mL、100 ng/mL、50 ng/mL、25 ng/mL、10 ng/mL、5 ng/mL的标准溶液。 仪器 液相色谱-串联质谱检测器（ESI源）。 分析天平：感量0.1mg。 涡旋混合器。 离心机：转速10000r/min,容量为10mL。 分析步骤 5.1 化妆水、面霜、粉底类化妆品 称取样品0.2g（精确到0.01g），置于10mL具塞塑料离心管中，加入3mL氯化钠饱和溶液（3.6），于涡旋混合器上使样品分散，加入3mL乙腈（3.2），充分涡旋，并超声提取30min，10000r/min 离心10min，吸出上层清液于另一10mL 具塞塑料离心管中，下层氯化钠饱和溶液用3mL乙腈（3.2）重复提取步骤一次，合并两次乙腈提取液，往提取液中加入正己烷（3.4）2 mL，涡旋离心，分层，弃去上层正己烷溶液，再在乙腈层加入正己烷2 mL，涡旋离心，分层，弃去上层正己烷溶液，转移下层乙腈溶液至另一10mL玻璃刻度试管中，用氮气吹至近干，并用30%甲醇水溶液重新溶解、定容至2mL，并经0.2 μm滤膜过滤后作为测定液上机测定。 5.2 洗面奶、沐浴液类化妆品 称取样品0.2g（精确到0.01g），置于10mL具塞塑料离心管中，加入3mL氯化钠饱和溶液（3.6），于涡旋混合器上使样品分散，加入3mL乙醚（3.5），充分涡旋，并超声提取30min，10000r/min 离心10min，吸出上层清液于另一10mL 具塞塑料离心管中，下层氯化钠饱和溶液用3 mL乙醚（3.5）重复提取步骤一次，合并两次乙醚提取液，用氮气吹至近干，并用30%甲醇水溶液2mL重新溶解，再加入8mL 纯水稀释。 HLB 固相萃取小柱（3.7），接上固相萃取装置，小柱预先用10mL 甲醇、10mL水进行活化、平衡。将待净化的样品溶液倾倒入固相萃取小柱，待样品溶液自然流尽后，依次用10mL纯水、5mL 10%甲醇溶液淋洗小柱；待淋洗液自然流尽后，用吸球吹出小柱中的残留液，并用10mL新配5%氨水甲醇溶液洗脱固相萃取小柱，并收集洗脱液，并经氮气吹至近干，并用30%甲醇水溶液重新溶解、定容至2mL，并经0.2 μm滤膜过滤后作为测定液上机测定。 5.3 指甲油、口红 称取样品0.2g（精确到0.01g），置于10mL具塞塑料离心管中，加入3mL乙腈（3.2），于涡旋混合器上使样品分散溶解，充分涡旋，并超声提取30min，10000r/min 离心10min，取上层清液于另一10mL 具塞塑料离心管中，下层样品残渣再用3 mL乙腈（3.2）重复提取步骤一次，合并两次乙腈提取液，往提取液中加入正己烷（3.4）2 mL，涡旋离心，分层，弃去上层正己烷溶液，再在乙腈层加入正己烷2 mL，涡旋离心，分层，弃去上层正己烷溶液，转移下层乙腈溶液至另一10mL玻璃刻度试管中，用氮气吹至近干，并用30%甲醇水溶液重新溶解、定容至2mL，并经0.2 μm滤膜过滤后作为测定液上机测定。 测定 液相色谱参考条件 以下为液相色谱参考条件： 色谱柱：C18，1.7μm，100mm?2