水稻叶绿体转化载体pBS的构建及融合基因功能的-生命科学研究.PDFVIP

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2018-11-26 发布于天津
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水稻叶绿体转化载体pBS的构建及融合基因功能的-生命科学研究.PDF

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水稻叶绿体转化载体pBS的构建及融合基因功能的-生命科学研究

16 卷 5 期生命科学研究灾燥造援员6 晕燥援5 圆园12 年 10 月蕴蚤枣藻杂糟蚤藻灶糟藻砸藻泽藻葬则糟澡 Oct. 圆园12 水稻叶绿体转化载体pBS 的构建及融合基因功能的初步鉴定 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 婧 , 李丁 , 左佳 , 贺荣华 , 韩小霞 , 1, 2 1 1, 2* 邢俊杰 , 李祺, 曹孟良 (1. 中南大学研究生院隆平分院杂交水稻家重点实验室, 中湖南长沙410 125; 2. 家杂交水稻工程技术研究中心, 中湖南长沙4 10125) 摘要: 利用PCR 方法分别从载体pchN CAT Bar 和Psk51 中分离得到编码膦丝菌素乙酰转移酶基因bar 和绿色荧光蛋白基因sgfp , 并在bar 基因前段连接T7 leader sequence/5 忆 UTR 和T7 10 N terminus 的8 个氨基酸序列. 运用融合PCR 技术, 得到bar 和sgfp 的融合基因片段BS. 以水稻叶绿体基因组中的trnI 和trnA 为同源重组片段, 来自烟草叶绿体16S rRNA 的Prrn 为启动子, p sb A 基因的Tp sb A 为终止子, 融合片段作为双效筛选标记, 构水稻叶绿体转化载体pBS. 大肠杆菌原核表达检测到明显荧光, 基因枪轰击TP309 愈伤, 筛选抗性愈伤. 关键词: 水稻; 叶绿体转化; bar 基因; 绿色荧光蛋白(sGFP); 融合PCR + 中图分类号: Q343.3 7 文献标识码: A 文章编号: 1007 7847(2012)05 0389 06 Construction of the Chloroplast Vector pBS for Rice Transformation and Functional Preliminary Identification for the Fusion Genes GAO Jing1, 2, LI Ding1, 2, ZUO Jia1, 2, HE Rong hua1, 2, HAN Xiao xia1, 2, 1, 2 1 1, 2* XING Jun jie , LI Qi , CAO Meng liang (1. State Key Laboratory of Hybrid R ice, Longp ing Branch of Graduate School, Central South Unive rs ity, Changsha 4 10125, H unan, China; 2. China National Hybrid R ice R D Center, Changsha 4 10125, H unan, China) Abstract ：Bar gene an