紫堇灵的分离制备及抗炎活性-中国药科大学学报.PDFVIP

学 报 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１７，４８（６）：７１５－７２０ ７１５ 紫堇灵的分离制备及抗炎活性 １ １ ２，３ ２，３ 张　浩 ，李木子 ，翟晓婷 ，朱粉霞 １ ２ （南京中医药大学药学院，南京２１００２３；南京中医药大学附属江苏省中西医结合医院，南京２１００２８； ３江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药口服制剂释药系统重点研究室，南京２１００２８） 摘　要　旨在从苦地丁药材中分离出紫堇灵，从ＴＬＲｓ／ＮＦＢ信号传导通路角度探讨其抗炎作用机制。以８０％乙醇提取、 κ １ １３ 硅胶柱色谱等方法制备紫堇灵，ＵＰＬＣ、ＭＳ、ＨＮＭＲ、ＣＮＭＲ等方法进行纯度及结构鉴定；利用ＭＴＴ实验评价紫堇灵的细 胞毒性；采用脂多糖（ＬＰＳ）诱导的 ＲＡＷ２６４７巨噬细胞建立炎症模型，用紫堇灵进行干预，以Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术检测 ＲＡＷ２６４７巨噬细胞中ＴＬＲ４、ＴＬＲ２、ＩＢ、ｐＩＢ、ｐ６５和ｐｐ６５蛋白的表达水平；进而通过实时荧光定量ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ κα κα 技术分别检测ｐ６５ｍＲＮＡ及细胞核ｐ６５表达情况。实验发现，在ＬＰＳ诱导的ＲＡＷ２６４７炎症细胞模型中，５～４０ ｍｏｌ／Ｌ紫 μ 堇灵呈正相关下调ＲＡＷ２６４７细胞中ＴＬＲ４、ＴＬＲ２蛋白的表达水平，抑制ＩＢ 磷酸化并从基因水平和蛋白水平抑制ｐ６５ κα 转位入核。结果表明，紫堇灵可能是通过ＴＬＲｓ／ＮＦＢ信号通路发挥对ＬＰＳ致ＲＡＷ２６４７细胞炎症的抑制作用。 κ 关键词　紫堇灵；脂多糖；ＲＡＷ２６４７巨噬细胞；抗炎机制 中图分类号　Ｒ９６５　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１７）０６－０７１５－０６ ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８ 引用本文　张浩，李木子，翟晓婷，等紫堇灵的分离制备及抗炎活性［Ｊ］．中国药科大学学报，２０１７，４８（６）：７１５－７２０ Ｃｉｔｅｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅａｓ：ＺＨＡＮＧＨａｏ，ＬＩＭｕｚｉ，ＺＨＡＩＸｉａｏｔｉｎｇ，ｅｔａｌＡｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｒｙｎｏｌｉｎｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＣｏｒｙｄａｌｉｓｂｕｎｇｅａｎａＴｕｒｃｚ． ［Ｊ］．ＪＣｈｉｎａＰｈａｒｍＵｎｉｖ，２０１７，４８（６）：７１５－７２０ ＡｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｒｙｎｏｌｉｎｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＣｏｒｙｄａｌｉｓｂｕｎｇｅａｎａＴｕｒｃｚ． １ １ ２牞３ ２牞３ ＺＨＡＮＧＨａｏ牞ＬＩＭｕｚｉ牞ＺＨＡＩＸｉａｏｔｉｎｇ 牞ＺＨＵＦｅｎｘｉａ １ ２ ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ牞ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１００２３牷ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅ