铁皮石斛组织培养研究-北京农业职业学院学报.PDF

第32卷 第1期 北京农业职业学院学报 Vol.32 No.1 2018年1月 Journal of Beijing Vocational College of Agriculture Jan. 2018 铁皮石斛组织培养研究 陈兰芬，汤久杨，马  喆 （北京农业职业学院，北京 102442 ） 【摘 要】为了解决铁皮石斛种苗稀缺的现状，提高种苗繁殖率，以铁皮石斛种子（成熟率80% ～ 90%）、带芽茎段、 叶片3 种材料作为外植体，进行组织培养研究。结果表明：铁皮石斛最适宜外植体材料是种子，最适宜的类原球茎诱导 培养基为1/2MS，最适宜的类原球茎增殖培养基为MS + KT1.5 mg/L + NAA0.5 mg/L + CM 100 mL/L + 活性炭0.3 g/L，最适 宜类原球茎分化培养基为MS + KT1.5 mg/L + NAA0.5 mg/L + 100 mL/L 苹果汁, 最适宜生根培养基为MS + IBA1.5 mg/L。 【关键词】铁皮石斛；类原球茎；增殖；分化；生根 【中图分类号】S603 【文献标识码】A 【文章编号】1671-7252 （2018 ）01-0024-07 铁皮石斛（Dendrobium candidum ）为兰科 1.2　方法 (Orehidaeeae) 石斛属 (Dendrobium ) 多年生草本 1.2.1铁皮石斛外植体筛选 植物。铁皮石斛药用价值极高，但其生长缓 以铁皮石斛种子（成熟率 80% ～ 90%）、带 慢、自身繁殖能力很低，传统的分株繁殖大大 芽茎段、叶片 3 种材料作为外植体。自来水冲 制约了铁皮石斛产业的发展。随着生物技术研 洗干净后，再用洗涤灵水溶液清洗 30 min，流 究的发展，用组织培养技术进行铁皮石斛的繁 水冲洗材料 1h。之后拿到超净工作台上用 70% 殖，可以大大提高繁殖系数，短期内生产出大 酒精清洗 0.5 ～1 min，再分别用 0.1% HgCl 消毒 2 量的种苗，对解决目前石斛种苗稀缺的现状， 10 min。培养温度为 (25 ±1)℃，光照度为 2 000 lx， 实现药用石斛资源的可持续发展利用，具有重 光照时间 12 h。 要意义。 1.2.2铁皮石斛类原球茎诱导培养基筛选 以 MS、1/2MS、1/4MS 和 B5 四种培养基为 1 材料和方法 基本培养基，每种培养基接种 20 瓶，30 天后调 1.1　材料 查接种处理外植体萌发类原球茎情况。筛选适 以铁皮石斛的种子、叶片及带芽茎段为试 合铁皮石斛外植体类原球茎萌发的基本培养基。 验材料，进行铁皮石斛外植体筛选，试验材料 1.2.3铁皮石斛类原球茎增殖培养基筛选 均取自北京农业职业学院兰花温室。 以诱导出的铁皮石斛类原球茎为试验材料， 【基金项目】北京农业职业学院技术开发与示范推广基金 （XY-YF-13-38 ） 【收稿日期】2017-06-26 【作者简介】陈兰芬(1981— )，女，北京人，北京农业职业学院实验实训中心副主任、高级实验师，硕士。研究方向： 园艺植物组织培养。 — 24 — 陈