实验一紫外－可见分光光度法测定水中苯酚的含量（3学时）.doc

实验一 紫外－可见分光光度法测定水中苯酚的含量（3学时） 一、实验目的 1. 学习使用UV757CRT紫外可见分光光度计。 2.掌握紫外－可见分光光度法测定水中微量苯酚含量的方法。 二、实验原理 紫外－可见吸收光谱属分子吸收光谱法，当分子吸收到外来的辐射能量（光区范围在200-800 nm）时，分子外层价电子发生能级跃迁，进而产生吸收光谱。紫外光谱具有灵敏度高、准确度好、仪器价格低廉、操作简便等许多优点，主要应用于化合物的定量分析。其定量分析的主要依据为朗伯－比尔定律 A = ?bc 式中，A---吸光度，???化合物的摩尔消光系数（L/(mol cm)），b—比色皿厚度（cm），c—溶液浓度（mol/L）。 根据上述公式，吸光度与溶液浓度呈线性关系，如已知某物质的摩尔吸光系数，就可以根据吸光度值得出待测溶液的摩尔浓度。 三、实验仪器、试剂 UV757CRT紫外－可见分光光度计 容量瓶1 L 容量瓶50 ml 1 cm标准石英比色皿（吸收池） 苯酚(AR) 待测苯酚溶液 移液管 (2 ml、5 ml、10 ml) 丙酮 擦镜纸 四、实验步骤 1. 打开电源，开机进行自检。 2. 配制苯酚标准溶液 a. 精确称取苯酚0.3000 g，放入1 L容量瓶中，加蒸馏水摇匀，定容至 b. 分别精确量取上述标准液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml，分别定容至50 ml，按序编号。 3. 绘制苯酚的标准吸收曲线 取上述3(4)号标准液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，在190-400 nm波长范围内进行扫描，绘制苯酚的标准吸收曲线，并选取272 nm附近最大吸收波长为本实验的入射波长。 4. 绘制吸光度-浓度工作曲线 分别取上述配制的5组溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，并绘制成吸光度-浓度曲线，计算得到回归方程。 5. 待测溶液浓度的测定 取待测苯酚溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，代入回归方程中，计算待测溶液的克浓度和摩尔浓度(mol/L)；并通过朗伯-比尔公式计算苯酚的摩尔吸光系数。 五、结果与讨论 1. 标准溶液 序号 苯酚标液体积 (ml) 稀释后浓度 (mg.ml-1) 吸光度（平均值） 1 2.0 2 3.0 3 4.0 4 5.0 5 6.0 回归方程： 相关系数：R2 ＝ 吸光度-浓度工作曲线 2. 待测溶液 序号 吸光度 平均值 浓度 (mg.ml-1) 摩尔浓度 (mol.L-1) 1 2 3 3. 摩尔吸光系数 ?????????????? 文献： L.mol -1.cm -1 实测： L.mol -1.cm -1 六、注意事项 1. 除去扫描苯酚的标准吸收曲线外，其余的每组实验均须平行做三次，然后取平均值； 2. 在自检过程和扫描过程中，不要按动任何键，不要打开样品室的盖子； 3. 注意保护吸收池，特别是石英比色皿，吸收池的光学面必须保持清洁，严禁用手触摸，如果光学面有污渍或尘土时，可用擦镜纸轻轻拭去； 4. 吸收池内部应用去离子水进行清洗，然后用少量丙酮或乙醇除水，常温下放置干燥； 七、思考题 在苯酚的吸收曲线中有两个吸收峰，本实验选用272 nm作为入射波长，是否可以用210 nm作测定波长，为什么？ 实验二 固体、液体样品红外吸收光谱的测定与分析（2学时） 一、实验目的 1. 了解红外光谱仪的基本构造、组成及各部件的作用、使用维护过程中应注意的事项等； 2. 掌握红外光谱分析固体样品的制样技术； 3. 掌握红外光谱分析液体样品的制样技术； 4. 掌握根据红外光谱特征吸收峰鉴别特定官能团。 二、实验原理 1. 当样品受到频率连续变化的红外光照射时，物质分子吸收了某些频率的辐射，并由其振动或转动运动而引起偶极矩的净变化，产生分子振动和转动能级从基态到激发态的跃迁，使相应于这些吸收区域的透射光强度减弱。记录红外光的百分透射比（或吸光度）与波数关系曲线，就得到红外光谱，根据谱带的位置、峰形及强度，对待测样品进行分析。 2. 将固体样品与卤化碱（通常是KBr）混合研细，并压成（半）透明片状，然后放到红外光谱仪上进行分析，即为压片法。 3. 液体池通常由后框架、窗片框架、垫片、后窗片、间隔片、前窗片以及前框架七部分组成。使用时，将液体池倾斜30°，用注射器（不带针头）吸取待测样品，由下孔注入直到上孔有样品溢出为止，用聚四氟乙烯塞子塞住上、下注射孔，然后用高质量的纸巾擦去溢出的样品后，即可进行测试。 三、实验仪器、