三疣梭子蟹Portunustrituberculatus肝胰腺内源酶性质的初步研究.PDFVIP

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2018-10-26 发布于天津
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三疣梭子蟹Portunustrituberculatus肝胰腺内源酶性质的初步研究.PDF

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三疣梭子蟹Portunustrituberculatus肝胰腺内源酶性质的初步研究

三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)肝胰腺内源酶性质的初步研究杨利珠, 张莉, 黄琳, 孟祥红 ( , 266003) 摘要: 内源酶是三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)体内重要的酶, 往往会导致梭子蟹死后肌肉组织迅速软化, 严重影响了蟹肉的贮藏品质。为了探明该酶的基本特性, 本试验从三疣梭子蟹肝胰腺中提取了粗酶, 优化了提取方法, 并对其部分酶学性质进行初步研究。结果表明: 三疣梭子蟹肝胰腺内源酶最佳浸提时间段为4~12 h, 酶比活显著高于0~4 h 和 12~14 h; 以酪蛋白为水解底物, 内源酶作用最适温度为 65 ℃、最适pH 范围为7.0~8.0; 丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂, 包括大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI) 和苯甲基磺酰氟(PMSF), 对内源酶活力的相对抑制率分别为 100%、70.46%±6.27%, 显著高于其他抑制剂的相对抑制率, 推测丝氨酸蛋白酶为主要内源酶; 在硫酸铵分级沉淀中, 分别以酪蛋白和 Boc-Phe-Ser-Arg-MCA 为底物, 前者最适盐析浓度为0~70%, 后者为30%~70%, 酶比活显著高于其他盐浓度; 当硫酸铵浓度为40%~60%时, 盐析蛋白质含量、粗酶酶活和丝氨酸蛋白酶活均显著高于其他盐浓度。关键词: 三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus); 肝胰腺; 内源酶; 性质中图分类号: TS254.1 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2016)10-0097-08 doi: 10.11759/hykx20151224003 (Portunus trituberculatus) , 162 g , , 90%[1],  1.2 试验方法 1.2.1 , , 100 g, , 1 3(m/ V)–20 ℃, ︰ , 3min, , [6] , , –20 ℃ (Por