第1讲基因工程与细胞工程.DOC

PAGE PAGE 1 第1讲　基因工程与细胞工程 考纲要求　1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅰ)。4.植物的克隆(Ⅰ)。5.动物的克隆(Ⅰ)。 构建网络　内化体系 填充关键点 思考连接处 (1)基因工程和克隆技术操作的工具酶有什么不同？ 提示　前者涉及限制性核酸内切酶和DNA连接酶；后者涉及纤维素酶、果胶酶和胰蛋白酶。 (2)转基因植物的培育涉及到哪些生物工程？ 提示　基因工程、植物组织培养(植物细胞工程)。 (3)转基因动物的培育涉及到哪些生物工程？ 提示　基因工程、动物细胞工程、胚胎工程。 考点1　基因工程 1． 比较限制性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和解旋酶 种类 项目 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 DNA分子 DNA分子片段 脱氧核苷酸 DNA分子 作用部位 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 碱基对间的氢键 作用结果 形成粘性末端或平末端 形成重组DNA分子 形成新的DNA分子 形成单链DNA分子 2． 重组DNA分子的构建过程 【思维辨析】 (1)生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶(2012·四川，2D) ( × ) 提示　不需要DNA连接酶。 (2)一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列(2007·全国Ⅱ，4A)( √ ) 提示　这是限制性核酸内切酶的特性决定的。 (3)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸(2010·浙江，2A) ( × ) 提示　限制性核酸内切酶切割的是DNA，烟草花叶病毒的核酸是RNA。 (4)应用DNA探针技术可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达(2011·四川，5D) ( × ) 提示　不能检测其完全表达。 (5)每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(2011·浙江，6B) ( √ ) 提示　载体的特点之一是至少含一个限制性核酸内切酶识别位点。 (6)自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上，属于基因工程(2010·大纲全国Ⅱ，5D) ( × ) 提示　噬菌体DNA整合到细菌DNA上属于基因重组，不是人工操作，基因工程是人工操作。 (7)转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加(2010·江苏，18B)( × ) 提示　在转抗虫基因植物的选择作用下，抗性强的昆虫得以保留。 (8)动物的生长激素基因转入植物后不能表达(2010·江苏，18C) ( × ) 提示　基因工程打破了物种的界限。 【归纳提炼】 1． 区分一个至多个限制性核酸内切酶切点与每种酶一个切点 (1)一个至多个限制性核酸内切酶切点：作为载体必须具有一个至多个限制性核酸内切酶切点，以便与外源基因连接。 (2)每种酶一个切点：每种酶的切点最好只有一个。因为一种限制性核酸内切酶只能识别单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能会丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制性核酸内切酶的一个切点，则酶切后既能把环打开接纳外源DNA片段，又不会丢失自己的片段。 2． 将目的基因导入受体细胞 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(用Ca2＋处理) 受体细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞 3． 目的基因的检测与鉴定 例1　(2013·新课标全国卷Ⅰ，40节选)阅读如下资料： 资料　科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。 回答下列问题： 资料属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用__________法。构建基因表达载体常用的工具酶有______________________和____________。在培育转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是________________________。 破题思路　读懂资料信息→联系相关知识→规范作答。 个性分析　动物细胞基因工程中，最常用的导入基因的方法是显微注射法；植物细胞基因工程中，最常用的导入基因的方法是农杆菌转化法。 答案　显微注射　限制性核酸内切酶　DNA连接酶　农杆菌可感染植物将目的基因转移到受体细胞中 思维延伸　(1)资料为什么将基因表达载体导入小鼠的受精卵中？ 提示　因为受精卵具有全能性。 (2)资料中转基因烟草的培育，除涉及到基因工程外，还涉及到的生物工程技术是什么？ 提示　植物组织培养。 例2　如图一是利用基因工程生产人胰岛素的主要流程图，图二是生产过程中所制备的带有目的基因