乳及乳制品中尿素氮的测定分光光度法-紫外可见分光光度计.PDFVIP

ICS 67. 100 X 16 D B 1 3 、吧竺，． J ． 冫刊 丬 ﹄ 卜 省 地 方 标 准 DB 13/ T 1111-2009 乳及乳制品中尿素氮的测定 分光光度法 Determination of urea content in milk and dairy produce Spectrophotometricmethod 2009-05-27发布 2009-06-11实施 河北省质量技术监督局 发布 DB 13/ T 1111- 2 009 月 i j 舌 本标准河北省质量技术监督局提出。 本标准起草单位：河北省食品质量监督检验研究院、国家环保产品质量监督检验中心、河北省食品 安全重点实验室、河北省化学工业研究院。 本标准主要起草人：李玉国、张岩、谢乐、王丽霞、李丛芬、苏红维、刘东、李挥。 DB 13/ T 1111- 2 009 乳及乳制品中尿素氮的测定分光光度法 1范围 本标准规定了乳及乳制品中尿素氮含量的分光光度测定方法。 本标准适用于乳及乳制品中尿素氮含量的测定。 本标准的检出限：0.01g/L0 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682分析实验用水规格和试验方法 3 原理 尿素与二乙酞一肟在酸性条件下，经或三价铁离子的催化产生缩合，并在氨基硫脲存在下生成了4, 5一二甲基一2一氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含量成正比。 4 试剂 除另有规定，所有试剂均为分析纯，为GB/T6682规定的一级水。 4. 1酸性试剂：在1L容量瓶中加入蒸馏水约100mL，然后加入浓硫酸44mL及85%磷酸66mL, 冷却至室温后加入硫氨脲80mg，硫酸镉2g,溶解后用蒸馏水稀释至1000mL,贮棕色瓶中放冰箱内 保存半年不变。 4. 2二乙酞一肟溶液（(2%)：称取2g二乙酚一肟，溶于蒸馏水中，定容至100 mL混合均匀。 4.3尿素反应液：取酸性试剂90mL加二乙酞一肟溶液10mL,混合均匀即可。 4.4尿素标准储备溶液：准确称取lg （精确至0. 1mg）尿素于100 mL的容量瓶中，用蒸馏水溶解 定容至刻度。尿素含量10g/L，作为贮备溶液。 4.5尿素标准使用系列溶液：准确吸取尿素贮备溶液0.00mL, 1.00mL,2.00mL.3.00mL.4.00 mL, 5.00mL于50 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，浓度分别为0. 00 g/L, 0. 20 g/L, 0. 40 g/L, 0.60 g/L, 0.80 g/L, 1.00 g/L的系列标准溶液，置于冰箱冷藏保存。 5 仪器 5. 1分光光度计。 5. 2刻度吸管：2 mLo 5. 3具塞试管：20 mLo 6分析步骤 吸取牛奶试样和尿素标准系列溶液各0.1mL于20mL具塞试管中，再分别向各管加入5mL尿素反 应液，盖紧试管塞，于95℃水浴中反应20min，用滤纸过滤后，于波长525rim处测定吸光度，绘制标 准曲线比较，同时做试剂空白。 7结果计算 1