东方田鼠骨髓基因池的构建及抗日本血吸虫抗性相关-生命科学研究.PDF

第 卷 第 期 生命科学研究 / =# / =# 299 年 月 +2 ?@AB C(@BD(B %BEBFG(4 )B(# 299 第 期 !!! 东方田鼠骨髓基因池的构建及抗日本血吸虫 抗性相关基因的筛选 秦志强，胡维新，邬国军，许 冰，申群喜，龚 强，吴 驰 （ ） 中南大学 湘雅医学院分子生物学研究中心，中国湖南 长沙 +995/ 摘 要：利用表达克隆法，从东方田鼠骨髓细胞中克隆出抗日本血吸虫抗性相关基因 首先提取高质量的 # $%’ ，逆转录成()’ ，将()’ 与哺乳动物细胞瞬时表达载体*()’ +# +, ’$* 连接，建立表达()’ 文库； 将 文库分成 个基因池，转染 细胞， 后收集培养上清，获得条件培养基 将条件培养 ()’ ’-. / .0123! / 4 # 基与日本血吸虫童虫一起培养，观察杀虫效应，取对童虫抑制作用最强的基因池 再分成 个亚基因池 ， 0 / 0 +-/ 分别转染.0123! 细胞，并将条件培养基与血吸虫童虫一起培养，获得具有明显抑制血吸虫童虫活性的亚基因 池055 ，按上述方法反复进行筛选，直到获得有抑制作用的单个克隆，该技术的建立为克隆东方田鼠抗日本血 吸虫抗性相关基因以及研究其作用机制奠定基础# 关键词：东方田鼠；基因池；表达克隆法；日本血吸虫；抗性相关基因 中图分类号： 文献标识码： 文章编号 : ; 65/7 ’ 8 +995-5/5 299 9-9!!!-97 !#$%’(%)# * +,#, -. * !#$%’( ) %$( /#0 1(,,#)#2 3,$)$%/#(,45$$()/%,0 +,#,$ % 6#*,(%)# * *#+(%(%,- . -/ %0#’, ， ， ， 6H I4@-J@FDK .L MB@-N@DK ML OP=-QPDR SL T@DK ， ， C.0 6PD-N@ OUO 6@FDK ML V4@ （