HPLC法测定盐酸左氧氟沙星口服溶液中右氧氟沙星的含量.docVIP

HPLC法测定盐酸左氧氟沙星口服溶液中右氧氟沙星的含量 二.一.年六月重庆中草药研究第1期(总第61期)3 HPLC法测定盐酸左氧氟沙星口服溶液中右氧氟沙星的含量 杨勇1,2傅启昌黄艳芳3 (1.重庆大学生物工程学院重庆400044;2.重庆健能医药开发有限公司重庆401121; 3.重庆莱美药业股份有限公司重庆401121) 摘要:目的:建立盐酸左氧氟沙星口服溶液中右氧氟沙星的含量测定方法.方法:采用HPLC法,C18柱,以硫酸 铜D一苯丙氨酸溶液(取D一苯丙氨酸1.32g与硫酸铜1g,加水1000ml溶解后,用氢氧化钠试液调节pH值至3.5)一 甲醇(82:18)为流动相;柱温40~C;流速lml?rain一;检测波长为293nm.结果:检测3批盐酸左氧氟沙星口服溶液,采 用自身对照法计算右氧氟沙星的含量,分别为0.205%,0.198%和0.236%.结论:该方法专属性强,灵敏度高,精密度 好,耐用性好,能够较好地检测出盐酸左氧氟沙星口服溶液中右氧氟沙星的含量. 关键词:HPLC盐酸左氧氟沙星口服溶液右氧氟沙星光学异构体含量 左氧氟沙星是氧氟沙星中的左旋光学异 构体,其活性是右氧氟沙星的8～128倍,是外 消旋体的2倍【1】,其不良反应发生率也比氧氟 沙星低得多.2004年美国FDA批准了强生制 药公司的新型口服抗菌药物盐酸左氧氟沙星 口服溶液网上市,目前国内盐酸左氧氟沙星主 要上市剂型有片剂,胶囊剂,注射剂等,我公司 研制开发了盐酸左氧氟沙星口服溶液,为了提 高产品质量,我们建立了HPLC法测定盐酸左 氧氟沙星口服溶液中右氧氟沙星的含量,介绍 如下: 1仪器与试药 1.1仪器 高效液相色谱仪(LC—IOA,SPD一10A,AT一 330),日本岛津公司;紫外分光光度计(T6新世 纪),北京普析通用公司;pH计(PHS一3C),上海 雷磁仪器厂;电子天平(CP225D),德国赛多利 斯公司. 1.2试药 盐酸左氧氟沙星原料(上虞京新药业有限 公司,批号0708222);盐酸左氧氟沙星口服溶 液(重庆健能医药开发有限公司,批号2009O1O1,20090103,规格20mg?ml);空白辅料 溶液(重庆健能医药开发有限公司,批号KB20090 101);左氧氟沙星对照品(中国药品生物制品检 定所,批号30455—200604,含量97.3%);氧氟沙 星对照品(中国药品生物制品检定所,批号 130454—200604,含量98.6%);甲醇为色谱纯,其 余试剂为分析纯. 2试验方法与结果 2.1色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(C18 柱);以硫酸铜D一苯丙氨酸溶液(取D一苯丙氨 酸1.32g与硫酸铜1g,加水1000ml溶解后,用 氢氧化钠试液调节pH值至3.5)一甲醇(82:18) 为流动相;柱温40%;流速lml?min;检测波长 为293nmt3]. 2.2测定方法 取样品适量,加流动相溶解并稀释制成每 lml中含左氧氟沙星1.0mg的溶液,作为供试 品溶液,精密量取适量,加流动相制成每lml 中含左氧氟沙星10tzg的溶液,作为对照溶液. 4第1期(总第61期)重庆中草药研究二.一.年六月 取对照溶液201M注人液相色谱仪,调节检测灵 敏度,使主成分峰峰高约为满量程的20o/0—25%, 精密量取供试品溶液与对照溶液各201.d,分别 注入液相色谱仪,记录色谱图,供试品溶液如有 右氧氟沙星杂质峰,按自身对照法计算含量. 2.3系统适用性试验 取氧氟沙星对照品适量,加流动相溶解并 稀释制成每lml中约含0.2mg的溶液,取201~1 注入液相色谱仪,右氧氟沙星,左氧氟沙星依 次流出,理论板数按左氧氟沙星峰计算达到 4482,右,左旋异构体峰之间的分离度达到3.1 (见图1). 图1系统适用性试验图谱(1右氧氟沙星,2左氧氟沙星) 2.4专属性试验 2.4.1辅料干扰试验 通过对盐酸左氧氟沙星原料,空白辅料溶 液,盐酸左氧氟沙星口服溶液样品在200— 400nm波长范围进行紫外光谱扫描试验,液相 色谱分离试验,结果显示:盐酸左氧氟沙星在 卜 A 293nm波长处有最大吸收,空白辅料在293nm 波长处无明显吸收(见图2);盐酸左氧氟沙星, 空白辅料,盐酸左氧氟沙星口服溶液样品的色 谱图(见图3);结果表明空白辅料不干扰盐酸 左氧氟沙星及右氧氟沙星的测定. 稍潮I 鳓;! . \, ～～ ∞刚 琏 暂郜螂娃￡ C 图2紫外扫描图谱(A空白辅料B原料C样品) ABC 图3辅料干扰试验图谱(A空白辅料B原料C样品) 二.一.年六月重庆中草药研究第1期(总第61期)5 2.4.2破坏性试验 为了解盐酸左氧氟沙星口服溶液主药的 降解途径,降解产物对光学异构体右氧氟沙星 检测的影响,及评价检测方法的