一种辣椒RopGTPase激活蛋白基因的分离及其特征分析Isolationand.PDF

Online system: http://www.j 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2012, 20(11): 1223~1233 DOI: 10.3969/j .issn.1674-7968.2012.11.001 研究论文 Article 一种辣椒Rop GTPase 激活蛋白基因的分离及其特征分析 1 1 1 1 1 2 1 1 1，2* 邱爱连 蔡汉阳 陈彦生 刘志钦 吴明伟 官德义 牟少亮 赖燕 何水林 1 福建农林大学生命科学学院，福州350002；2 福建农林大学作物科学学院，福州350002 * 通讯作者，hsl324@ 要 Rop (Rho-related GTPase of plant) 是植物中存 的一种特殊的小G 蛋白。其与GTP(guanosine ，与 triphosphate)结合形成激活态 GDP(guanosine diphosphate)结合形成失活态，并通过其激活态和失活态 。 。本 的转换启动和终止植物多种信号过程 Rop 不同结合形式的转换受到一系列调控因子的调控 研究以 一个辣椒(Cap s icum annuum L.) Rop 蛋白(CaRop 1)的组成型激活态CA-CaRop1 为诱饵，利用ProQuestTM 酵母双杂交体系，从辣椒幼苗猎物文库中分离获得一种Rop GTPase 激活蛋白 (Rop GTPase activating ， proteins, RopGAP)基因，将其命名为CaRop GA P3 。生物信息学分析表明 CaR op GA P3 全长 1 597 bp ，包含 ，编码 ， 一个 1 437 bp 的开放阅读框 478 个氨 酸，其氨 酸序列不仅含有3 个保守的GAP 结构域 其N 端还含有CRIB(Cdc42/Rac-interactive binding motif)结构域，属于植物特有的一类RopGAP 亚家族。酵母 双杂交验证显示CaRopGAP3 只能与组成型激活态(CA) 的CA-CaRop1 互作而不能与显性失活态(DN) 的 且含 。亚细胞定位分析显 DN-CaRop1 互作， CRIB 结构域的N 端 他们之间的互作没有明显的调控作用 ， ，且含 。荧光定量 示 CaRopGAP3 主要分布于细胞膜上 CRIB 结构的N 端 其膜定位中起重要调节作用 ， ，约为幼根的 PCR 分析显示 CaRop GA P3 基因 辣椒幼叶中的表达量最高 17 倍、成熟根和花器官的8 倍。CaRop GA P3 基因的这种结构及组织表达特点可能与其参与的特定信号路径密切相关。本研究为进一 步解析辣椒CaRop1 介导的信号调控机制提供 础数据。 ，