流式细胞仪现状与临床应用进展北京大学第一医院检验科吴煦-yeec维修网.PDFVIP

流式细胞仪现状与临床应用进展 北京大学第一医院检验科 吴煦，王建中 作者吴煦，毕业于北京医科大学医学检验专业，在美国BD 公司生命科学部 从事流式细胞仪及其相关产品的技术应用支持工作，现在北京大学第一附属医院检 验科攻读硕士学位，师从王建中教授。 摘要：本文主要介绍了流式细胞仪以及新发展的仪器检测技术和目前主要的 临床应用，包括细胞免疫表型分析，红细胞和血小板分析，细胞功能分析，以及细 胞DNA 分析等；最后介绍了临床流式细胞分析应用的新进展和新的应用领域，以及 流式细胞术应用于细胞组学提供预测医学信息的概况。 关键词：流式细胞术，流式荧光定量分析，流式微球技术，流式细胞原位杂 交分析，细胞组学 Status Quo and Clinical Application Development of Flow Cytometry Clinical Laboratory, Peking University First Hospital Xu Wu, Jianzhong Wang ABSTRACT: This article introduced flow cytometry techniques, and presently major clinical applications, such as immunophenotyping, red blood cell and platelet analysis, cell function analysis, and DNA analysis. Finally, it introduced newly exploited clinical applications and new diagnostic fields of flow cytometry, and cytomics by flow cytometry to provide diagnostics information as predictive medicine. KEY WORDS: Flow cytometry, Quantitative flow cytometry, Cytometric bead array, Flow-FISH, Cytomics 流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种对处在液流中的细胞或其他生物 微粒，以及人工合成微球逐个进行多种物理或生物学特征快速定量分析和分选的技 [1] 术 。流式细胞仪是测量细胞的散射光和标记荧光强度的细胞分析仪，是在单个细 胞分析基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质（如大小、内部结构、DNA、 RNA、蛋白质、抗原等）进行快速测量，并分类收集的高精密仪器。流式细胞仪可 以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个细胞特征参数，进行定性 或定量分析，具有速度快、精度高、准确性好等特点，成为当代最先进的细胞定量 分析技术。如今，流式细胞仪（图1，最常用的流式细胞仪，配备双色激光器）以 其快速、灵活、大量、灵敏和定量的特点，广泛应用于基础研究和临床实践各个方 面，如细胞生物学、细胞遗传学、生物化学、免疫学、肿瘤学、血液学等。 图1：BD 公司临床型流式细胞仪FACSCalibur 一、流式细胞仪工作原理 将待测细胞制成经荧光染色的单细胞悬液，在一定压力驱动和鞘液包绕作用 下，细胞排成单列高速通过流动室，形成细胞液柱。当液柱中的细胞通过检测区 时，在激光光源照射下，产生散射光和荧光信号。光散射信号分为前向角散射光 （FSC）和侧向角散射光（SSC），它们分别反映细胞的大小和颗粒度，根据这些特 性可以初步将细胞分类。经过一种或几种荧光标记的样本，在激光束的激发下，可 以产生特定波段的荧光，荧光信号的接收方向与激光束垂直，经过一系列双色性反 射镜和带通滤光片，几种不同波长的荧光信号被分离开来，由相应荧光检测器接 收，这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或细胞内物质的浓度。 接收的光信号最终转换为可被计算机识别的数字信号，输送到计算机中进行分析， 进而得到相应细胞的各种特性分布和计数结果 （图2）。