竞争性抑制.pptxVIP

一、实验目的 学习掌握酶竞争性抑制的概念和特点 学习丙二酸对琥珀酸脱氢酶竞争性抑制 实验的设计思路和方法二、实验原理酶的竞争性抑制作用 抑制剂和底物结构相似，可与底物竞争结合酶的活性中心，阻碍酶-底物复合物形成抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力，以及抑制剂与底物浓度的相对比例（[I]/[S]）FADHOOC—CH2—CH2—COOH甲烯白MBH2 （无色） 丙二酸HOOC—CH2—COOH琥珀酸脱氢酶甲烯蓝MB （蓝色）FADH2HOOC—CH=CH—COOH在无氧条件下以甲烯蓝褪色时间判断琥珀酸脱氢酶活性高低，观察竞争性抑制作用三、实验步骤1. 酶提取液的制备 处死大白鼠，分离出肌肉。 制备匀浆液。２. 酶促反应及竞争性抑制作用 取试管6支，按表所列步骤操作。 加液体石蜡以隔绝空气37℃水浴保温 随时观察并记录各管褪色时间！！！3. 实验记录和结果分析 试管编号123456[I]/[S]0:11:101:110.1--褪色时间酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？各管的褪色情况有何区别？为什么？丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型及其特点是什么？本实验中5号、6号试管的作用是什么？四、结果分析1、酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？2、各管的褪色情况有何区别？为什么？3、丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型 及其特点是什么？如何证明的？4、本实验中5号、6号试管的作用是什么？五、注