不同温度下两株球孢白僵菌侵染西花蓟马的生长动力学-中国农业科学.PDF

中国农业科学 2018,51(8):1484-1492 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2018.08.006 不同温度下两株球孢白僵菌侵染西花蓟马的 生长动力学及其毒力 刘晓晨，吴圣勇，雷仲仁，王海鸿 （中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点试验室，北京 100193） Beauveria bassiana ）在不同温度条件下侵染西花蓟马 摘要：【目的】通过比较两株球孢白僵菌（ （ Frankliniella occidentalis ）的生长动力学及其毒力，探讨球孢白僵菌菌体增殖和杀虫毒力的关系，为提高 球孢白僵菌对西花蓟马的杀虫效率提供理论支持。【方法】首先，在20、25和30℃ 3 个温度条件下，连续记录第 1—8 天西花蓟马被两株球孢白僵菌菌株（SCWJ-2 和 GZGY-1-3）侵染后的死亡率，并以未被真菌感染的西花蓟马 为对照，计算其累积校正死亡率，选择第3天的数据（对照死亡率为2%—5%）比较两个菌株的杀虫效率。其次， 在20、25和30℃ 3个温度条件下，连续记录第1—8天内平板培养的上述两个菌株的菌落直径，选取第3天两个 菌株的菌落生长直径数据进行比较分析。最后，提取 20、25 和 30℃温度下，西花蓟马分别被两株球孢白僵菌侵 染第1、2 和3 天的混合DNA，通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术定量球孢白僵菌在每个宿主样品体内的拷贝 数，选取第3 天两个菌株的基因拷贝数进行比较分析。【结果】生物测定结果显示，在检测温度（20—30℃）范围 内，球孢白僵菌菌株 GZGY-1-3 和 SCWJ-2 对西花蓟马成虫均具有较高致病性，无论任何温度和何种菌株，西花蓟 马从处理后第2天开始有死亡个体出现，第8 天时，SCWJ-2 和GZGY-1-3造成的校正死亡率分别为83%—91%和79% —90%。以第 3 天的校正死亡率为指标（对照死亡率为 2%—5%），30℃下菌株 SCWJ-2 毒力显著高于 GZGY-1-3（P ＜0.05），25℃和 20℃下两个菌株毒力无显著差异（P ＞0.05）。平板培养试验表明，在检测温度（20—30℃）范 围内，两个菌株菌落直径随着时间推移而增加，第8天时，菌株SCWJ-2和GZGY-1-3 的菌落直径分别为31—36、 28—32 mm。选取第3天菌落生长直径数据进行比较，菌株SCWJ-2在3个温度下的菌落直径均显著大于菌株GZGY-1-3 （ P ＜0.05）。实时荧光定量结果显示，除 30℃下的菌株 SCWJ-2 之外，两个菌株在西花蓟马体内的基因拷贝数都 在第1天时下降，2 d后又逐渐上升。使用第3天西花蓟马体内的基因拷贝数进行分析，在30℃下菌株SCWJ-2真 菌拷贝数显著大于 GZGY-1-3（P ＜0.05），25℃和 20℃下两个菌株基因拷贝数无显著差异（P ＞0.05）。【结论】真 菌在被侵染虫体内的基因拷贝数受到菌株和温度的影响，这与生物测定结果相一致。与菌株GZGY-1-3 相比，SCWJ-2 更适合高温条件下对西花蓟马的防治。 关键词：球孢白僵菌；西花蓟马；真菌生长动力学；实时荧光定量PCR Growth Kinetics and Virulence of Two Beauveria bassiana Strains in Frankliniella occidentalis Under Different Temperatures LIU XiaoChen, WU ShengYong, LEI ZhongRen, WANG HaiHong (State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy o