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  • 2018-10-12 发布于重庆
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化学发光专利申请模板

权利要求书 1、一种沙丁胺醇的化学发光酶联免疫检测试剂盒,包括盒体,设在盒体内的酶标板和设在盒体内的沙丁胺醇的多克隆抗体、辣根过氧化酶标记的羊抗兔的抗体、沙丁胺醇系列标准溶液、浓缩磷酸盐缓冲液、浓缩洗涤液、化学发光液;其特征在于,所述酶标板的各孔包被有以克伦特罗与卵清蛋白偶联制成的包被抗原;所述沙丁胺醇的多克隆抗体是由沙丁胺醇与分子量范围是6.7 KDa~6.8 KDa的牛血清蛋白偶合制成的偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔制备获得;所述辣根过氧化酶标记的羊抗兔的抗体的工作浓度为1:2000;所述沙丁胺醇系列标准溶液浓度分别为:0.1 ng/mL,0.2ng/mL, 0.5ng/mL、l.0ng/mL,2.0ng/mL和5.0ng/mL;所述浓缩磷酸盐缓冲液是每升含NaCl 80g, KH2P04 2.0g,Na2HP04.12H20 29.0g, KCl 2.0g的水溶液;所述浓缩洗涤液是含有体积分数0.05%吐温-20的pH7.5, 0.1 mol/L的磷酸盐缓冲液;所述化学发光液是0.01鲁米诺与pH=8.8,0.001M对甲苯酚的三(羟甲基)氨基甲烷溶液和体积比浓度为3/10000 H2O2的混合液。 2、根据权利要求1所述沙丁胺醇的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述酶标板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光酶标板。 3、根据权利要求1所述沙丁胺醇的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述包被抗原浓度为2.5μg/mL 。 4、根据权利要求1所述沙丁胺醇的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述卵清蛋白的分子量范围是6.7 KDa~6.8 KDa。 5、根据权利要求1所述沙丁胺醇的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述沙丁胺醇的多克隆抗体的工作浓度为1:10000。 一种沙丁胺醇的化学发光酶联免疫检测试剂盒 技术领域 本发明涉及一种检测沙丁胺醇的化学发光免疫检测试剂盒,用于检测动物源性食品如肌肉组织、内脏、血液、尿液和饲料中的沙丁胺醇含量或残留量。属于免疫学检测领域。 背景技术 沙丁胺醇属于β-兴奋剂,β-兴奋剂是一类化学合成的苯乙醇胺类衍生物。β-兴奋剂作用机理和肾上腺素、去甲肾上腺素相同,可影响营养物质在动物体内的流向和重新分配,有效促进肌肉组织生长,降低胴体脂肪含量,提高瘦肉率和增加瘦肉产量,因而曾在欧美广泛使用。运动员使用此药,可以增加肌肉和肺活量,缩短高强度训练后的恢复期。但另一方面,β-兴奋剂具有类似肾上腺素的化学结构,而且这类化合物作为促生长剂的用量一般较高,一般为治疗用量的5~10倍。事实表明此类药物不易破坏,如果在屠宰前没有经过一定时间的休药期,则在肌肉和内脏器官会残留较高浓度的药物。如果人食用了含有这些残留药物的可食性组织,这些药物就能与细胞表面的β-受体结合而产生明显的生理作用,如心悸、头疼、目眩、恶心、呕吐、战栗、神经过敏、血管扩张、心率加快等,尤其是对高血压、心脏病、糖尿病、甲亢患者危害更大,严重的可导致死亡。因此为了保证消费者的安全,目前欧美各国均禁止其在畜牧生产上的应用。但还是有某些国家和地区的饲养者在食用性动物喂养中添加沙丁胺醇,导致相关动 物性食品中有沙丁胺醇残留,因此定期对沙丁胺醇残留进行检测成为许多国家的监控的必要手段。 目前,检测沙丁胺醇的方法主要有:微生物法、薄层色谱法(TLC)、放射免疫法,高效液相色谱法(HPLC)、色/质联用分析法(LC-MS)、液/质联用分析法(LC-MS/MS) 。微生物法的缺陷是:费时而且缺乏特异性。薄层色谱法的缺陷是:操作过程复杂,时间长;操作人员需要经过专业培训;影响分析的干扰因素较多,结果重复性差。薄层色谱法、放射免疫法,高效液相色谱法、色/质连用分析法、液/质联用分析法这些理化方法的缺陷是仪器设备昂贵,样品前处理复杂,费时,费力,不易普及,检测费用高,特别是放射免疫法还需要配备放射源,有一定危险性。鉴于此,建立一种有效、快速、简单、灵敏的检测沙丁胺醇的方法具有重要意义。 发明内容 本发明的目的是提供一种沙丁胺醇的化学发光酶联免疫检测试剂盒。该试剂盒具有检测灵敏度高、应用灵活、方便的特点。 本发明所述沙丁胺醇的化学发光酶联免疫检测试剂盒,包括盒体,设在盒体内的酶标板和设在盒体内的沙丁胺醇的多克隆抗体、辣根过氧化酶标记的羊抗兔的抗体、沙丁胺醇系列标准溶液、浓缩磷酸盐缓冲液、浓缩洗涤液、发光液;其特征在于: 所述酶标板的各孔包被有以沙丁胺醇与卵清蛋白偶联制成的包被抗原;其中所述包被抗原浓度优选2.5ug/mL。 所述酶标板优选乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光酶标板。 所述卵清蛋白的分子量范围优选6.7 KDa~6.8 KDa。 所述沙丁胺醇系列标准溶液

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