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微生物的实验室培养选修
微生物的类群病毒:无细胞结构原核细胞细菌、蓝藻等原核生物:如酵母菌、霉菌真菌:真核细胞原生生物:单细胞的动植物如草履虫、单细胞藻类等微生物一般个体微小,包含了除植物界和动物界以外的所有生物课程标准进行微生物的分离和培养。课标解读1.知道培养基的基础知识,进行无菌技术的操作。2.进行微生物培养。 培养基的成分及无菌操作技术 1.培养基 (1)培养基概念 按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质。营养物质生长繁殖(2)培养基种类包括 培养基和 培养基等。(3)培养基的化学成分一般都含有 、 、 和 四类营养成分。还需要满足微生物生长对 、 及 等的要求。液体固体氮源无机盐碳源水pH特殊营养物质氧气2.无菌技术 (1)无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括以下四个方面 ①对实验操作的 、操作者的 ,进行清洁和 ; ②将用于微生物培养的器皿、 和 等进行 ; ③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行; ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。空间消毒衣着和手接种用具培养基灭菌酒精灯火焰周围的物品(2)消毒和灭菌①消毒:消毒是指使用 方法仅杀死物体表面或内部一部分 的微生物, (包括;不包括)芽孢和孢子,常用的方法有 消毒法、 消毒法、 消毒法。②灭菌:灭菌是指使用 杀死物体内外 , (包括,不包括)芽孢和孢子,常用的方法有 灭菌、 ___灭菌和 灭菌。较为温和的物理或化学对人体有害不包括煮沸巴氏化学药剂强烈的理化因素所有的微生物包括灼烧干热高压蒸汽[思维激活1] 用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌?70%与95%的酒精,哪一种效果更好?为什么?提示 酒精擦拭属化学消毒,酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。1.碳源、氮源及生长因子的来源与功能归纳营养要素来源功能碳源无机碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物①构成细胞物质和一些代谢产物;②有机碳既是碳源又是能源有机碳源糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等氮源无机氮源无机氮:NH3、铵盐、硝酸盐、N2等将无机氮合成含氨的代谢产物有机氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物生长因子维生素、氨基酸、碱基①酶和核酸的组成成分;②参与代谢过程中的酶促反应特别提示 (1)微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。(2)对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机物既是碳源,又是氮源、能源。(3)大凡对生长因子不能合成或合成能力有限的微生物,其培养基中均需额外添加生长因子,而许多微生物能自行合成生长因子,其培养基中不需再添加。2.培养基类型划分划分标准培养基种类特 点用 途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂,如琼脂观察微生物的运动、分类鉴定固体培养基微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)分类、鉴定用途选择培养基培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐)鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物,如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈现黑色,并带有金属光泽)【巩固1】 下列培养基配方中能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是( )。原料①②③④蛋白胨/糖/g5555蔗糖/g5555KH2PO4/g2222伊红/g0.4美蓝/g0.065琼脂/g1020NaCl/g20蒸馏水/mL1 0001 0001 0001 000A.①③ B.②①C.②④D.③①解析 高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长,从而可以将金黄色葡萄球菌分离出来,有高浓度食盐的培养基为选择培养基。在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌,有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。答案 D3.无菌技术(1)消毒和灭菌的区别条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌(2)无菌技术主要操作要求①实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所用器具和培养基灭菌。②实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另
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