靶向基因编辑技术在秀丽隐杆线虫中应用.PDFVIP

靶靶向向基基因因编编辑辑技技术术在在秀秀丽丽隐隐杆杆线线虫虫中中的的应应用用 陈向阳, 冯雪竹 and 光寿红 Citation: 中国科学: 生 科学 ; doi: 10.1360/N052017-00250 View online: http://engine.scichina.co /doi/10.1360/N052017-00250 Published by the 《中国科学》杂志社 Articles you may be interested in 基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的人类遗传疾病基因治疗相关研究进展 中国科学: 生 科学 47, 1130 (2017); CRISPR/Cas9技术在生物医学领域的非病毒及病毒载体 中国科学: 生 科学 47, 1141 (2017); 基因组编辑技术及其在昆虫研究中的应用 中国科学: 生 科学 43, 1105 (2013); 植物基因组编辑试剂材料的导入及转化系统的研究现状及前景 中国科学: 生 科学 47, 1159 (2017); 腺相关病毒载体的靶向策略探讨 科学通报 52, 1107 (2007); 中国科学: 生命科学 SCIENTIASINICAVitae 评 述 靶向基因编辑技术在秀丽隐杆线虫中的应用 * * 陈向阳, 冯雪竹, 光寿红 中国科学技术大学生命科学学院, 中国科学院分子细胞科学卓越创新中心, 合肥230027 * 联系人,E-mail: xychen91@; sguang@ 收稿日期: 2017-10-27; 接受日期: 2017-12-16; 网络版发表日期: 2018-03-08 国家重大科学研究计划(批准号:2017YFA0102903)、国家自然科学基金(批准号3137132391640110)和安徽省自然科学 基金(批准号:1608085MC50)资助 摘要 遗传突变体和转基因是生物学研究的基础, 是揭示生物体内各个基因相互作用的生物学研究对象. 秀丽隐 杆线虫(Caenorhabditis elegans)是遗传学研究的模式生物, 如何有效地诱导特定基因发生突变和构建转基因线虫 品系是秀丽线虫遗传学研究的两个重要方面. 近些年来, 靶向基因编辑技术迅速发展, 使得科研人员可以在秀丽 线虫中快速而高效地编辑特定基因.本文就线虫中靶向基因编辑的方法,特别是CRISPR/Cas9技术, 以及目的线虫 品系的筛选进行了综述. 关键词 秀丽隐杆线虫, 靶向基因编辑,CRISPR/Cas9技术 秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)是一种可 编码了约两万多个蛋白编码基因, 超过40%的线虫基 以在土壤中独立生存的非寄生性线虫, 主要以土壤中 因在其他物种中有同源基因[3]. 研究人员通过遗传学 的大肠杆菌为食, 两侧对称, 体长约1mm, 全身透明, 突变手段构建了大量的线虫突变体和转基因线虫品 平均寿命可以达到二十多天[1,2]. 有雌雄同体和雄性两 系. 这些品系可以从美国线虫遗传学中心(Caenorhab- 种性别. 一条雌雄同体秀丽隐杆线虫自体受精可以产 ditis Genetics Center, CGC)和日本国家生物资源项目 生约300个后代; 与雄性个体交配后的雌雄同体线虫 (National BioResource Project, NBRP)数据库中 [4,5] 最多可以产生约1000个后代. 秀丽隐杆线虫的繁殖周 获取 . 期大约是3天, 极大地节约了遗传学实验所需要的时 线虫遗传学家使用多种化学诱变剂和物理诱变剂 间; 约300个个体的后代繁殖率为遗传筛选提供了大 来诱导基因组发生随机突变, 正向遗传筛选参与特定 量的可能发生突变的线