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香菇多糖的提取、纯化及组成分析
摘要:本实验通过热水提取,所得多糖用苯酚-硫酸法测定其含量,运用Sevag法除蛋白,通过Folin一酚法测定蛋白质含量,再用95℅乙醇沉淀,利用高效液相色谱法测定香菇多糖的单糖组分。结果发现香菇多糖的单糖组分主要有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖,其各单糖组分比例为Man:Rha:Glu:Gal=1.96:1.00:20.40:1.78。
关键词: 香菇多糖;提取;纯化;组成分析
Extraction, Purification and Analysis of Lentinan
Abstract: The present study refines water-soluble polysaccharide from Lentinan by hot water extraction. Determination of polysaccharide content by Phenol sulfuric acid method. Then removing protein by Sevag method, determined protein by Folin-phenol, precipitation by 95 ℅ ethanol,using Gas chromatography analysis the monosaccharide. The results showed that Lentinan monosaccharide composition Contains: Mannose,Rhamose ,Glucose ,Galactose and rhanose with a molar ratio of 1.96:1.00:20.40:1.78.
Keywords:Lentinan; Extraction; Purification; Monosaccharide analysis
前言
近二十年来,由于分子生物学的发展,人们逐渐认识到糖及其复合物分子具有极其重要的生物功能,糖与免疫功能的调节、细胞与细胞的识别、细胞间物质的运输、癌症的诊断与治疗等,都有着密切的关系多糖在医药上还是一种很好的佐剂。最近又发现多糖的糖链在分子生物学中具有决定性作用。此外它还能控制细胞的分裂和分化、调节细胞的生长和衰老。多糖在食品工业、发酵工业及石油工业上也有着广泛的应用。因此,在开展多糖资源的开发、多糖结构的分析、多糖药理作用等的研究方面,人们做了大量的工作。多糖是来自高等植物、动物细胞膜、微生物细胞壁中的天然大分子物质,是所有生命有机体的重要组成部分,并与维持生命所需的多种生理功能有关。但就其研究状况而言,糖类尽管也取得了巨大的进展,但与蛋白质和核酸的飞跃式发展相比,显得远远落伍。对多糖的研究,最早是在20世纪40年代,其中研究得较早且最多的,是从细菌中得到的各种荚膜多糖,它在医药上主要用于疫苗[1]。但多糖作为广谱免疫促进剂而引起人们的极大重视则是在20世纪60年代。尤其是近二十年来,由于分子生物学的发展,人们逐渐认识到糖及其复合物分子具有极其重要的生物功能并且相继多次召开了有关“糖生物学和糖工程”的专题会议,1984年,苏联人在荷兰召开的第十二次国际碳水化合物讨论会上报道了用全合成特定结构的荚膜多糖作疫苗,受到与会者的极大兴趣[2]。尔后,有关真菌多糖的研究为深入和广泛,如酵母菌多糖、食用菌多糖,特别是食用菌多糖的研究,报道数量较多。
香菇又名香草、香信、冬菇、厚菇、花菇等。香菇是侧耳科的担子菌,世界名贵食用兼药用菌之一。香菇多糖是一种结构复杂的高分子化合物,具有多种生物活性,在生物体内起着重要作用。近年来,国内外学者对香菇多糖的药理作用做了大量研究,香菇中的多糖具有抗肿瘤、降血脂、抗血栓、抗菌、抗病毒等功效[3]。它含有多种有效药用组分,如香菇多糖、木质素等,而引起人们广泛地重视。全世界香菇集中分布在亚洲东南部国家和地区。我国香菇的分布比较广泛, 尤以东南部省区如福建、浙江、广东、广西、四川、云南等分布较多。香菇营养丰富, 滋味鲜美, 具有独特的色香味, 是世界上著名的食用菌之一。据分折, 每克干香菇中, 含有碳水化合物克, 蛋白质克, 脂肪克, 粗纤维克, 并含有一定数量的钙、磷、铁以及维生素等, 同时还含有多种酶和人体所必需的氨基酸, 营养价值很高[4]。
我国是食用菌生产大国,其中香菇的产量在世界居首位。近年来,食用菌多糖的研究开发进入了一个崭新的发展时期,现在真菌多糖的研究主要针对香菇、金针菇、银耳、灵芝、蘑菇、黑木耳、茯苓和猴头菇等大型食用或药用真菌,这些真菌多糖具有通过活化巨噬细胞刺激抗体产生,提高人体免疫能力的生理功能,由于具备比从动物血液中提取的免疫球蛋白更大的实用
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