7 蛋白质合,加工与运输.pptVIP

第四章 蛋白生物合成、加工成熟及输运 第一节 蛋白生物合成概述 复制(replication); 转录(transcription); 反转录(reverse transcription); 蛋白质翻译(translation) 三 tRNA及反密码子: 二级结构为三叶草; 三级结构为”倒L”形 tRNA的两个活性部位： 氨基酸臂和反密码环 tRNA的搬运和接头功能 四 核糖体: 大亚基功能位点： A位点: 结合氨酰tRNA P位点: 肽酰基位点 E位点: 空载tRNA位点 小亚基功能位点： 结合mRNA 4 蛋白合成终止及释放: 第二节 蛋白前体加工及成熟 一 加工类型: 1 N-末端和C-末端的修饰： 在甲酰化酶和氨肽酶的作用下切除起始Met或f Met，有的还被进一步乙酰化； C-末端残基有时也被修饰。 2 -S-S-键的形成： 在生物体内是由专一酶(PDI)所催化 3 aa的修饰： ① 甲基化：对Arg、His、Lys、Glu 等进行甲基化修饰 ② 磷酸化：Ser,Thr,Tyr的单酯；如牛奶酪蛋白 Arg,His,Lys等的磷酰亚胺等 ， ③ 羟化：Pro ? Hyp等； ④ Pro顺反异构化(PPI所催化) 4 异戊二烯基团等的附加： 某些真核蛋白需要被异戊二烯化，异戊二烯来自胆固醇合成，以硫醚键与Cys连接。如：ras肿瘤基因产物、G蛋白等 5 糖侧链连接： 某些糖蛋白在合成时或合成后，被共价连接上单糖、寡糖或多糖侧链。连接方式为与Asn形成氮连寡糖链（内质网腔）；或与羟基aa形成氧连寡糖链（高尔基体） 6 辅基的附加： 一般是在多肽离开核糖体后才加入的，如Cytc的血红素辅基；乙酰辅酶A羧化酶的生物素辅基等。 7 多余肽段的切除： 前体蛋白需切除部分肽段后，才显示生物活性，肽段种类不同，对蛋白成熟具有不同的意义。 2、胰凝乳酶原激活： 酶原含有245aa，经历两次加工成为活性凝乳蛋白酶 第一步： 酶原? ?-凝乳酶 （胰蛋白酶催化） 第二步： ?-凝乳酶相互催化，去除两个二肽 成为含三个肽段的 活性蛋白酶 凝乳蛋白酶酶原激活过程中蛋白构象变化： ? 胰酶切断Arg15-Ile16之后，Ile16内转并以其氨基与酶分 子内部的Asp194-COOH发生静电作用，形成盐键，稳 定初步激活形式。 ? Met192从分子内部移动至表面 ? Gly187和Gly193更加伸展 ? 最终在分子表面形成一个允许芳香族及较大侧链非 极性基团进入的底物专一性部位—— 一个“大口袋” 3、胃蛋白酶原激活： 由胃壁腺细胞分泌 酶原中活性中心已存在，在中性条件下被封闭 酶原 前体片断( 44aa,碱性)：6×Lys + 1×Arg 结构蛋白( 酸性): 酸性侧链 ?盐键 ? PH5时羧基质子化?盐键断裂? 构象重排 ? 活性中心暴露 ?自我催化?胃蛋白酶+前体片段 第三节 信号肽与细胞内蛋白跨膜运输定位 一 信号假说（signal hypothesis）： 由Blobel 1971年提出信号肽理论 70年代末发现并破译第一个信号序列 80年代初发现两个功能蛋白: 信号识别蛋白(SRP) , 停泊蛋白(DP) 90年代在内质网上找到了神秘的蛋白通道 1999年，Blobel因信号理论获得 Nobel生理/医学奖 细胞内蛋白质运输存在两类不同的运输机制： 翻译后运送，如蛋白跨越细胞器 细胞内运输机制 边翻译边运送，如蛋白跨越内质网 二 信号肽引导的蛋白跨内质网运输： 1 信号肽及结构 : 粗糙内质网核糖体合成三类主要蛋白： ①溶酶体蛋白 ②分泌到胞外的蛋白 ③构成脂膜骨架的蛋白 某些分泌蛋白、分泌途径的膜蛋白N末端有一段延伸的肽段，可引导