Watesr-G2-S-UPLC-QTOF-液相色谱-高分辨质谱联用仪-操作规程.docxVIP

Waters UPLC-QTOF 高分辨液质联用仪 操作规程 仪器操作 准备工作 检查管道氮气、高纯氩气气路与压力是否正常。如不合适请调整气路与气源。 检查应急供电UPS是否工作正常。如不合适请联系相关维修人员。 检查实验室环境，包括温度、湿度等是否正常。温度保持在21-25 oC，一天内温度变化波动不超过5 oC；湿度保持在70%以下。如不合适请联系相关维修人员 确认各流动相瓶内溶液体积大于瓶体积50%；有机流动相使用HPLC级与HPLC级以上的乙腈与甲醇；离子对添加剂使用HPLC级与HPLC级以上的甲酸、甲酸铵、乙酸铵等；高纯水存放时间不超过一周。 流动相中仅能加入5 mM浓度以下的挥发性缓冲盐，如甲酸铵、乙酸铵等。 所有新配置的流动相均充分混匀后在超声10分钟，排除气泡。 开机过程： 打开电脑，输入密码: waters 进入windows的桌面。 打开液相各个模块的电源（没有顺序）。 打开氮气发生器的电源（或液氮瓶的开关），确证压力指示在100psi；打开氩气减压阀确证压力指示在7psi。 打开MS tune窗口，点击右下角operate图标，右侧方块变绿色后仪器可以使用。 在Inlet Method窗口中编辑液相方法并保存。 在Inlet Method窗口中，使用Start up System功能平衡液相系统。 在MS tune窗口中设置质谱的参数。（主要是MS tune/ESI界面中各种电压，气体和温度） 在MS Console\Xevo QTOF\Intellistart窗口中完成:Creat calibration 和Lockspray Setup两项内容，结果均应为Pass。 在MS method窗口中编辑质谱方法，确保调用最新的Lockspray方法和Enable MS event。 在Masslynx的主界面上编辑进样序列（确保Sample name，ms method, inlet method, bottle position and Injection volume都选择相应的参数）。 点击进样按钮开始进样。 待机过程： 待机前，将色谱流动相流路切换至90%乙腈水溶液，以0.3 mL/min流速冲洗色谱柱20分钟。 在5分钟内将色谱流速从0.3 mL/min 缓慢降至0 mL/min。 打开MS Tune窗口，将质谱流路均切换至“Wash”模式，充分清洗质谱流路。 点击“Stand by”按钮，仪器进入待机模式 长假关机过程： 打开MS tune窗口，点击Vacuum/Vent，在弹出的对话框中选择yes。 等待约5分钟。（在这个过程中应该能听到分子泵降速的声音，也可以观察MS tune\View\vacuum, 三个Turbo speed的转速会逐渐下降，直至三个分子泵的转速均降至5以下，表明真空已经关闭）。 关闭所有软件和电脑。 关闭液相所有模块的电源。 关闭质谱前面板的电源。 关闭氮气发生器的电源（或是液氮罐的开关）。 关闭氩气减压阀。 关机结束。 仪器维护 做完实验：将sample spray和lockspray用50:50=MeOH：H20冲洗防止毛细管的堵塞； 平时放在source standby; 周末放在instrument standby； 偶尔检查真空泵油的液面位置； 废气排放空间通畅； 更换密封垫（建议一年一次）, 质谱可能存在的问题与排查方法 可能存在的问题 灵敏度突然间降低 空白溶液背景很高吗 排查方法 检查喷雾是否稳定 检查各个温度，气体流速，电压 检查进样系统是否正常工作 检查LE溶液浓度是否正确，长时间放置则需要重新配制 检查Lockspray毛细管是否堵塞，是否漏液，喷针位置是否正常 准备好仪器序列号，拨打800-820-2676获取维修支持。