1、微生物检验与控制资料教程.pptVIP

沉降菌监测 最小培养皿数 沉降菌测试时间 沉降平皿的暴露时间少于4小时； 如果同一位置使用多个沉降平皿进行监测并累计计数，单个沉降平皿的暴露时间可以少于4小时。 表面微生物取样点设置 取样点 设置原则 设备表面 是否与产品接触 墙面 距离地面高度约1.2-1.5m处 地面 房间中央，人员活动较多处 洁净服表面 袖口，肘部，胸前等 环境监测培养基的选择…… 微生物总数 细菌数：在细菌培养基上菌落形成单位的平均数。 真菌数：在真菌培养基上菌落形成单位的平均数。 微生物总数 = 细菌数 + 真菌数 培养基灭菌条件 -在无菌和过度加热之间平衡 -消毒锅灭菌结束后，不建议在其中存储培养基 -不正确的加热、灭菌条件会影响培养基的 颜色 澄清度 pH 凝固能力 促生长能力 选择性 制备培养基的储存: -低于0℃，凝胶结构破坏 -避光 避热 -琼脂培养基密封 融化 -重复融化应被限制（不超过一次）， 防止过度加热或潜在污染 -融化时，使用 水浴或流通蒸汽 微波炉，热板要防止过度加热 -融化的培养基储存 在40~45℃水浴不应超过8小时 浇制平皿前擦干 培养基应标示: -制备批号 -制备日期，有效期 -培养基名称 有效期确定 -根据成分，配方，容器，储存条件等确定 -生长能力试验数据支持 培养基储存: 培养基应根据生产商的说明书，并在验证过的条件下储存 培养基储存不得超过有效期 重要区域环控用培养基必须 -双层包装 -最终灭菌（？），否则进行全数预培养及用前检查 成品TSA平板可直接放常温？ 培养基质量控制： 所有待用的培养基应检查： -生长能力 每批制备的培养基均需进行 测试菌种根据药典，供应商说明及环境中分离得到的菌株 生长能力测试不合格 -调查 -不得使用该批号 -无菌 -pH，±0.2(琼脂有什么好的测试方法？) -容器/平皿的完整性 -抑制或指示能力 定期稳定性检查以确认储存效期 微生物菌种保藏：？ 建立标准程序处理、保存菌种。防止污染和特性变化 -必须小心地处理 -使用前确认菌种的身份，纯度 -根据生产商说明书复苏菌种，使用接种技术 - -70℃以下或冷冻干燥保存储备菌种，可延长保存周期 -开启后不要重新冷冻菌种 -追溯传代次数，不超过五代（？） 实验室设备维护 -绝大部分实验室设备需要进行标准的验证（IQ、OQ、PQ） -定期校准、保养 -定期进行性能检查 -根据设备的特性和使用状况确定频率 -定期清洁、消毒 实验室布局和运作： 目的：实验室布局应该有利于实验室运作。 -防止交叉污染 -活动分区 -注意安全 实验室应通过不同的进入通路和隔断来区分“洁净”区和“阳性”区，包括更衣，清洁，消毒。洁净区的生物安全柜仅用于无菌和洁净的操作。 样品发现微生物生长，后续的工作应转移至“阳性”区 样品处理： -大部分样品，水或环控样品中的微生物对操作、储存 环境敏感。 -减少样品，取样与测试间的间隔时间，并控制储存条 件。 -远距离的转移需确认转移条件对测试及样品的影响。 -可能的话，在无菌条件下，使用无菌技术取样，即使 是非无菌样品。 -取样记录 样品信息、取样日期、送样日期、人员/部门，实验 室样品，接受及确认 人员培训： 制药企业微生物实验室人员 -应该接受过微生物学或相关健康科学的正规学习（在校学习） -相关SOP的培训 -被赋予保持其技术和经验的职责 程序 —SOP应易于理解并作为培训计划的基础 —SOP的编号或标题提供了一个便利的将培训文件化方法 每个岗位应有相应培训要求，进行上岗前资质确认 文件： 实验室文件至少包括（不仅限于此）： -微生物人员培训和能力确认（上岗资质） -设备验证、校准和维护 -测试中的设备性能（如温度记录） -培养基制备、无菌检查、生长能力测试、选择性能力 -培养基清单与控制 -根据程序进行测试的重要参数 -数据和计算的确认 -经QA人员或相应领导审核过的报告 -超标调查结果 实验室结果： 记录重要的测试步骤及参数，用以确认结果的完整性，并为能重复测试提供信息 至少应包括（不仅限于此）： -日期 -测试样品 -微生物检验人员名字 -程序编号 -测试结果 -偏差（如有） -测试参数(设备，菌种，培养基) -管理人员审核签名 实验室维护： 设备 -重要设备记录在测试记录上 -校准计划 -适用的话，有使用记录 -重要的温度记录（水浴，培养箱，灭菌锅）应该具溯源性 数据纠错 -错误的地方划