抗氯嘧磺隆黑曲霉乙酰乳酸合成酶ALS酶学特性研究.PDFVIP

２０１０年１２月 中国油料作物学报 ２０１０，３２（４）：５６３－５６６ Ｃｈｉｎｅｓｅｊｏｕｒｎａｌｏｆｏｉｌｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅｓ 抗氯嘧磺隆黑曲霉乙酰乳酸合成酶 （ＡＬＳ）酶学特性研究 § §  张洪岩 ，张庆贺 ，张利斌，陶　波 （东北农业大学农学院，黑龙江 哈尔滨，１５００３０） 　　摘要：本文比较了不同黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）菌株对大豆田除草剂氯嘧磺隆的耐药性，并且对抗性菌株中 靶标酶乙酰乳酸合成酶（ＡＬＳ）的酶学特性进行了研究。结果发现ＴＲ－Ｈ为抗性菌株，其ＡＬＳ酶活性显著高于其 它菌株。酶学特性分析显示，ＴＲ－Ｈ菌株的最佳培养时间为８４ｈ，最佳反应温度为３５℃，最适反应ｐＨ为７．３，酶反 应的初速度范围为０～６０ｍｉｎ。以丙酮酸钠为反应底物时，其米氏常数（Ｋ）为３９．４１ｍｍｏｌ／Ｌ，最大反应速度（Ｖ ） ｍ ｍａｘ 为２３２．２ ｇ／ｍＬ·ｈ。 μ 关键词：氯嘧磺隆；黑曲霉；乙酰乳酸合成酶；酶学特性 中图分类号：Ｓ４５１．２２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００７－９０８４（２０１０）０４－０５６３－０４ ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒｔｏｃｈｌｏｒｉｍｕｒｏｎｅｔｈｙｌ § §  ＺＨＡＮＧＨｏｎｇ－ｙａｎ ，ＺＨＡＮＧＱｉｎｇ－ｈｅ，ＺＨＡＮＧＬｉ－ｂｉｎ，ＴＡＯＢｏ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ，ＮｏｒｔｈｅａｓｔＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ１５００３０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｌｅｒａｎｃｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒｓｔｒａｉｎｓｔｏｈｅｒｂｉｃｉｄｅｃｈｌｏｒｉｍｕｒｏｎｅｔｈｙｌｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｉｎ ｓｏｙｂｅａｎｆｉｅｌｄ．ＴｈｅＡＬＳｔａｒｇｅｔｅｎｚｙｍｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅａｌｓｏｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄａｒｅ ｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎＴＲＨａｎｄｉｔｓＡＬＳｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｏｔｈｅｒｓｔｒａｉｎｓ．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｃｏｎｓｔａｎｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｕｌｔｕｒｅｔｉｍｅｗａｓ８４ｈａｔ３５℃ ｗｉｔｈａｎｉｎｉｔｉａｌｖｅｌｏｃｉｔｙｏｆ０ｔｏ６０ｍｉｎ，ｐＨ７．３． Ｗｈｅｎｔｈｅｓｕｂｓｔｒａｔｅｗａｓｓｏｄｉｕｍｐｙｒｕｖａｔｅ，ｔｈｅＭｉｃｈａｅｌｉｓｃｏｎｓｔａｎｔ（Ｋ）ｏｆＡＬＳｗａｓ３９．４１ｍｍｏｌ／Ｌｗｉｔｈｔｈｅｍａｘｉｍａｌ ｍ ｒｅａｃｔｉｏｎｖｅｌｏｃｉｔｙ（Ｖ ）ｏｆ２３２．２ｇ／ｍＬ·ｈ． ｍａｘ μ Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｈｌｏｒｉｍｕｒｏｎｅｔｈｙｌ；Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ；Ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ；Ｅｎｚｙｍｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ 　　乙酰乳酸合成酶（ＡＬＳ）是植物和微生物氨基 制的ＡＬＳ抑制剂类除草剂的一种，以其低毒、超高 酸合成中的关键酶，控制着植物和微生物体内缬氨 效等特性在大豆田间广泛应用，尤其是对防除大豆 酸、亮氨酸、异亮氨酸３种支链氨基酸的生物合成 恶性田间杂草苣荬菜、刺菜