天津地区患有宫颈疾病妇女感染人乳头状瘤病毒情况的研究.docVIP

天津地区患有宫颈疾病妇女感染人乳头状瘤病毒情况的研究 　　【摘要】目的 了解天津地区患有宫颈疾病妇女感染人乳头状瘤病毒（HPV）的情况, 为本地区HPV感染情况提供流行病学数据。方法 2009年3月~2010年8月利用导流杂交基因分型技术对514例来自天津地区的宫颈疾病患者行HPV筛查，研究本地区HPV感染的特点。结果 HPV感染率为48.8%（251/514）,多重感染率为17.8%（92/514）。共检出315项HPV亚型，其中高危亚型感染率为60.3%（190/315），优势高危亚型为16、18、58，低危亚型感染率为32.4%（102/315），优势低危亚型为11、6。感染高峰在25～29岁, 40～44岁就明显下降。不同宫颈疾病优势亚型不同。结论 天津地区宫颈疾病妇女HPV感染率较高, 亚型分布、感染高峰年龄及不同宫颈疾病优势亚型具有一定的地域特点。 　　【关键词】宫颈疾病 人乳头状瘤病毒 基因亚型 感染 　　中图分类号：R737.33 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2011）5-151-02 　　 　　人乳头瘤病毒（Human papillomaviruses，HPV）是一种具有种属特异性的无包膜小DNA病毒，包含约8000个碱基，可致人类皮肤和黏膜异常增生。通过大量流行病学资料结合实验室的证据现已明确HPV感染是宫颈上皮内瘤变和浸润性宫颈癌发生的必要条件[1]。不同国家和地区,感染HPV的情况均已有研究[2] 。目前有关本地区的HPV在宫颈疾病妇女中的研究无相关报道, 笔者拟对此进行观察, 为本地区HPV 研究提供流行病学数据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 临床标本 　　来自于本院妇科2009年3月~2010年8月送检的宫颈疾病患者514例，主要来自天津市内四区及附近的周边郊区，年龄17~58岁，平均年龄（34.3 ±5.8)岁。 　　1.1.2 仪器与试剂 　　GeneAmp PCR System9600 PCR扩增仪(美国PE公司)。DNA 提取试剂盒、PCR扩增试剂盒、杂交试剂盒及HybriMax医用核酸分子快速杂交仪由广东凯普生物科技股份有限公司生产。 　　1.2 方法 　　1.2.1 标本的采集 　　HPV筛查标本取样步骤和要求按宫颈细胞学取材常规进行,采集标本放在盛有细胞保存液的小瓶中,4℃保存，一周内检测。 　　1.2.2 标本DNA的提取 　　取样本管中宫颈细胞悬浮液500μl，14000rpm离心5分钟，弃上清液后，用DNA 提取试剂盒提取标本HPV DNA。 　　1.2.3 PCR扩增 　　按每管23.25μl PCR mix、0.75μl Taq酶、1μl标本DNA溶液混匀后进行扩增。PCR反应条件：20℃预处理10min，95℃预变性9min，95℃20s，55℃30s，72℃30s，共40个循环，72℃延伸5min。每批同时扩增HPV阳性对照和阴性对照各一份。 　　1.2.4 杂交 　　PCR扩增产物经95℃变性5min后直接放入冰水混合物中冰浴至少2min，按照凯普公司杂交试剂盒说明书进行杂交。 　　1.2.5 结果判断 　　杂交完毕后，利用肉眼观察，按照基因芯片上HPV亚型分布相应着色点位判断结果，HPV分型阳性点呈紫色圆点，有两个或以上阳性点属多重感染，每张芯片设有反应质控点和杂交显色质控点各一个，以保证结果的真实可信性。 　　1.3 统计学方法 　　使用SPSS11.0进行数据统计分析，采用X2检验。 　　2 结果 　　2.1 感染阳性率 　　514例门诊就诊患者中共查出251例HPV阳性患者，感染阳性率为48.8%。 　　2.2 感染基因类型 　　在251例阳性患者中，共检出315项亚型，21种检测亚型被检测出19种，其中低危亚型占阳性标本的32.4%，按所占比例多少分别列出如下：11型（62例，19.7%），6型（37例,11.8%），43型（2例，0.6%），44型（1例，0.3%），未检出42型；高危亚型占阳性标本的60.3%，按所占比例多少分别列出如下，16型（39例，12.4%），18型（32例，10.2%），58型（28例，8.9%），31型（23例，7.3%），33型（20例，6.3%），52型（19例，6.0%），68型（14例，4.4%），56型（6例，2.0%），59型（3例，1.0%），45型（3例，0.9%），39型（2例，0.6%），51型（1例，0.3%），未检出35型；中国人群常见亚型占阳性标本的7.3%，按所占比例多少分别列出如下，53型（10例，3.2%），66型（9例，2.9%），CP8304（4例，1.2%），在本地区中多重感染率为 17.