苏州大学医学院医学二系教案课程临床免疫学与检验授课人于喜龙.DOC

苏州大学医学院医学二系教案 课程 临床免疫学与检验 授课人 于喜龙 授课时间2010年11月3日 专业 医学检验 年级 2007 班级 学生人数 30 教材 临床免疫学与检验 主编王兰兰 出版单位人民卫生出版社 出版日期2007年7月 章节 第十四章 教材页数 第161页至第177页 题目 第十四章 免疫细胞分离及其表面标志检测技术 目 的 要 求 1.掌握外周血单个核细胞的概念及其分离方法（Ficoll分离液法）；淋巴细胞及其亚群的分离，分离细胞的保存和活力鉴定；T、B、NK细胞表面标志的检测； 掌握免疫细胞表面标志的检测方法和临床意义。2.熟悉其他免疫细胞表面标志。3.了解不同细胞分离方法的综合评价。 授 课 内 容 、 安 排 、 方 法 、 重 点 难 点 及 时 间 分 配 讲授内容： （一）免疫细胞的分离 1.外周血单个核细胞的分离 2.淋巴细胞的分离 3.T和B细胞的分离 4.T细胞亚群的分离 5.不同细胞分离方法的综合评价 6.分离细胞的保存及活力测定 （二）淋巴细胞标志及亚群分类 1.T细胞表面标志及其亚群 2.B细胞表面标志 3.NK细胞表面标志 （三）其他的免疫细胞 1.单核－吞噬细胞系统 2.树突状细胞 （四）免疫细胞表面标志的检测及其应用 1.免疫细胞表面标志的检测方法 2.淋巴细胞表面标志检测的临床意义 二、方法：讲课采用Powerpoint多媒体幻灯的形式。 三、重点难点： 重点讲解外周血单个核细胞分离；T、B淋巴细胞的免疫磁珠分离; T、B和NK细胞的表面标志。难点讲解免疫细胞的分离和淋巴细胞表面标志。 四、时间分配： （一）免疫细胞的分离(50’) （二）淋巴细胞标志及亚群分类(30’) （三）其他的免疫细胞（10‘） （四）免疫细胞表面标志的检测及其应用（30’） 教媒 具体 及课 多件 方法：板书、多媒体 以多媒体教学为主，重点内容在黑板上以中英文强调。 具体教学内容 一、基本概念 1．外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMC） 二、基本内容 （一）、免疫细胞分离 1．外周血单个核细胞分离 具体讲解Ficoll分离外周血单个核细胞 2．淋巴细胞的分离 （1）粘附贴壁法 （2）吸附柱过滤法 （3）磁铁吸引法 （4）Percoll分离液法 3．T细胞和B细胞的分离 （1）E花环沉降法 （2）尼龙毛柱分离法 4. T细胞亚群的分离 （1）亲和板结合分离法（2）磁性微球分离法（原理、正选法、负选法）(3)荧光激活细胞分离仪分离法 5．不同细胞分离方法的综合评价 6. 分离细胞的保存及活力测定 （1）分离细胞的短期和长期保存 （2）细胞活力的测定 （二）淋巴细胞标志及亚群分类 1.T细胞表面标志（CD2、CD3、CD4、CD8、CD28、CD40L）、T细胞亚群（辅助性T细胞、细胞毒性T细胞和调节性T细胞） 2.B细胞表面标志（mIgM、mIgD、CD19/CD5、CD21、CD32、CD35、CD40、CD80/CD86） 3.NK细胞表面标志（CD3-CD16+CD56+） （三）其他的免疫细胞 1.单核－吞噬细胞系统 2.树突状细胞 （四）免疫细胞表面标志的检测及其应用 1.免疫细胞表面标志的检测方法 2.淋巴细胞表面标志检测的临床意义