蚊虫乙酰胆碱酯酶的真核表达纯化及活性测定-华中农业大学学报.PDF

第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报 31 4 Vol.31 No.4 年 月 , 2012 8 JournalofHuazhon A riculturalUniversit Au.2012423~427 g g y g 、 蚊虫乙酰胆碱酯酶的真核表达 纯化及活性测定 , 12 2 2 2 1 谭 烽 兰文升 崔 峰 乔传令 陈雯莉 , ; 1.华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 武汉 430070 , 2.中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理国家重点实验室 北京 100101 , , ; 摘要 利用 法从尖音库蚊中提取总 构建 文库 并克隆出乙酰胆碱酯酶外显子序列 利 Trizol RNA cDNA , 。 用 杆状病毒表达系统对蚊虫乙酰胆碱酯酶进行真核表达 并利用 琼脂糖对酶进行纯化 采用 BactoBac Ni -- - , 。 SDS对纯化产物进行检测 结果表明得到了纯度较高的乙酰胆碱酯酶 参照 Ellman法对酶的活性进行 , -4 /( ·)。 测定 结果显示纯酶的活力为 2.219×10 mol min g ; ; ; ; 关键词 有机磷农药 乙酰胆碱酯酶 昆虫杆状病毒表达系统 纯化酶 生物传感器 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) Q814 A 1000-2421201204-0423-05 [] ( ) 、 、 5 。 乙酰胆碱酯酶 AChE 是神经系统的重要物 有快速 灵敏度高 成本低等特点 一种有机磷水 , ——— 解酶 由于能够快速降解有机磷类农药而被广 质 它在胆碱神经突触处快速水解神经递质