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- 2018-11-16 发布于天津
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抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或
用纯化的INH抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的INH抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的INH呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度( 值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、?酶标板:一块(96孔)
2、?标准品(冻干品):?2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为4,000 pg/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成4,000 pg/ml,2,000 pg/ml,1,000 pg/ml,500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制2,000 pg/ml标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )4,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
1、 酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、 微量加液器及吸头,EP管
3、 蒸馏水或去离子水,滤纸
标本的采集及保存
1、 血清:全血标本请于室温放置2小时或4 过夜后于1000 g离心20分钟,
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