西兰花CYP83A1基因的克隆及序列分析-生物技术通报-中国农业.PDFVIP

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2018-11-16 发布于天津
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西兰花CYP83A1基因的克隆及序列分析-生物技术通报-中国农业.PDF

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西兰花CYP83A1基因的克隆及序列分析-生物技术通报-中国农业

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 2 :103-110 西兰花 CYP83A1 基因的克隆及序列分析曹阳理惠李勇孔稳稳李晶（东北农业大学生命科学学院农业生物功能基因重点实验室，哈尔滨 150030）摘要：为深入研究西兰花4- 甲基亚磺酰丁基芥子油苷的合成代谢途径，对关键合成酶基因CYP83A1 进行了克隆与生物信息学分析。根据前期西兰花转录组测序工作中获得的序列数据，同时参照GenBank 数据库中拟南芥、小白菜和油菜等7 种植物的基因CDS 序列与西兰花进行比对，确定西兰花基因（）的CDS 序列。采用RT-PCR 技术对其进行了克 CYP83A1 CYP83A1 BoCYP83A1 隆，获得BoCYP83A1 基因的CDS 区序列，其全长为1 509 bp，编码502 个氨基酸。预测该蛋白质的分子量为57.47 kD，理论等电点为 7.1，包含2 个跨膜结构域，且整个序列中不含信号肽，具有一个典型的P450 结构域。氨基酸同源性分析表明，西兰花与油菜、大白菜的CYP83A1 的相似性较高，均为98%。首次获得BoCYP83A1 的CDS 序列，其登录号为KM111290。关键词：西兰花；基因；芥子油苷；序列分析；抗癌活性 CYP83A1 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.02.015 Cloning and Sequence Analysis of CYP83A1 Gene from Brassica oleracea var. italica Cao Yanglihui Li Yong Kong Wenwen Li Jing （Key Laboratory of Agricultural Functional Genes ，Northeast Agricultural University College of Life Sciences ，Harbin 150030 ） Abstract ： To further research the related genes involved in 4-methylsulfinybutyl-glucosinolate biosynthesis in Brassica oleracea var. italica, the key synthetase CYP83A1gene was cloned and analyzed by bioinformatics. The sequence of CYP83A1 from the previous data of broccoli transcriptome sequencing and the sequences of CYP83A1 in seven other plants （Arabidopsis thaliana , B