医学分子生物学第五部分 基因组复制及DNA的损伤与修复.ppt

由基因重排引起的两种地中海贫血基因型 DNA损伤修复修复系统类型 碱基切除修复 核苷酸切除修复 碱基错配修复 重组修复 跨损伤DNA合成修复 碱基切除:单碱基损伤的主要修复途径 被切除的不是单个碱基，而是一段寡核苷酸。识别DNA双螺旋形状的变形。 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P DNA连接酶 NAD+ 核苷酸切除 碱基错配修复 纠正复制和重组中碱基损伤所致的碱基配对错误、插入与缺失等损伤，是碱基切除修复的一种特殊形式,在各种生物中普遍存在。 甲基化指导的错配修复原理 重组修复 对于DNA双链断裂损伤，细胞必须利用 双链断裂修复，即重组修复。 同源性重组 非同源性重组 跨损伤DNA合成修复 DNA双链发生的范围损伤，DNA损伤部位 失去了模板作用而终止复制时，细胞可以 诱导跨损伤DNA聚合酶置换受阻的复制性 聚合酶，而使DNA复制绕过损伤继续合成。 DNA损伤和修复的意义 所有生物基因组中的DNA并不稳定，很容易发生各种各样的、可以遗传的改变，即基因突变（mutation）。 按突变的形式，可以将突变分为碱基替换（base substitution）、缺失（deletion）和插入（insertion）等。 DNA损伤结果 功能丧失： 功能丧失可能是部分的或全部的。 功能获得：很多机制可以产生功能获得的显性表现型。 癌症发生：并非所有的突变都会导致疾病，一个正常细胞转变成恶性肿瘤需要以多种特异性的突变同时发生为条件。 DNA损伤的意义：进化，疾病 信号传导异常 长时辰效应 疾病 DNA 修复机制 短期效应 异常增生和代谢 生理功能紊乱 细胞死亡 细胞增殖减少 基因表达异常 基因组不稳定 第三节 损伤修复缺陷与疾病 一、DNA损伤修复障碍与多种疾病相关 例如： 家族性结肠息肉病，如父母一方有此病，子女有50％机会得病，此病极易发生癌变-结肠癌。 着色性干皮病是一种常染色体隐性遗传病。患者皮肤对日光过度敏感，暴露部位的皮肤易发生色素沉着、萎缩、角化过度和癌变等。 病因：DNA切除修复酶系统的功能缺陷或降低。 二、线粒体DNA损伤与疾病 与细胞核DNA相比，线粒体DNA非常小，是细胞核基因组之外具有独立复制功能的遗传物质。 人线粒体DNA为环状结构，含16 569bp。 每个细胞含有1000-10000个线粒体DNA分子。 线粒体DNA有37个基因，其中13个编码氧化磷酸化系统蛋白，2个编码核糖体RNA，22个编码tRNA。 线粒体DNA易损伤且修复机制不足 线粒体DNA特点：裸露在线粒体基质中，缺乏组蛋白保护，比细胞核DNA更容易受损伤因素影响。 损伤因素包括：细胞内的代谢产物和来自环境的毒性物质。如治疗药物、放射线、活性氧等。氧化磷酸化产生的超氧自由基也可损伤线粒体DNA。 线粒体DNA损伤修复机制，没有细胞核DNA损伤修复机制多，这是线粒体DNA突变率高的原因。 线粒体DNA缺乏核苷酸修复机制，碱基切除修复是线粒体DNA损伤修复最普遍修复方式。 线粒体只有一种DNA聚合酶（DNA pol γ）参与DNA复制和修复。 线粒体相关疾病主要由线粒体DNA突变引起 线粒体DNA突变主要在编码tRNA基因中，编码rRNA基因突变率低。 线粒体DNA突变主要为点突变和大规模缺失。 mtDNA异常与一些遗传性疾病相关，也与许多重大疾病相关。如心脏病、糖尿病、阿尔茨海默病、帕金森病和衰老等。 第五部分基因组复制及DNA的损伤与修复 基因组复制： 以亲代核酸链为模板按照碱基互补配对原则合成子链核酸的过程。 方式：DNA复制 DNA通过RNA中间体进行复制 RNA复制 RNA通过DNA中间体复制 第一节 真核生物基因组复制和调控 真核生物 DNA 复制过程 真核生物 DNA 复制过程与原核生物 基本相似，但参与复制过程的酶和蛋白 调节因子更为多样，其过程也更为复杂 并受到严格调控。 功能 DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? 5’?3’ 聚合酶活性 + + + + + 5’?3’ 外切酶活性 + + + + + 3’?5’ 外切酶活性 - - + + + 亚基数 4 4 4 2 2 细胞内定位 核 核 线粒体 核 核 在复制中的作用 引发酶活性，引物合成 DNA修复 线粒DNA 复制，损伤修复 新链合成， 切除修复 前导链复制，DNA修复 真核细胞常见的DNA聚合酶 ?真核生物DNA复制的有关酶类