百合雌蕊中杂交亲和性与不亲和性差异表达基因分析.pdfVIP

第39卷摇 第2期 北 京 林 业 大 学 学 报 Vol.39,No.2 2017年2月 JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY Feb. ,2017 鄄鄄 DOI:10.13332/ j.1000 1522 百合雌蕊中杂交亲和性与不亲和性差异表达基因分析 1 1 1,2 1,2 王摇 杰摇 贾月慧摇 张克中 摇 崔金腾 (1北京农学院园林学院摇 2 城乡生态环境北京实验室) 摘要:东方百合与卷瓣组野生百合杂交(简称OS组合),属于亲缘关系最远的组间杂交,杂交障碍最大。 挖掘雌蕊 中杂交亲和性与不亲和性差异表达基因,有可能解释不亲和性杂交中引起花粉管定向生长异常的机理,进而阐明 不亲和性杂交的分子机理,为实施克服杂交不亲和障碍技术措施提供依据。 本研究采用抑制消减杂交技术(SSH 技术),分别以不亲和性杂交和亲和性杂交的东方百合雌蕊为试验组(tester)和驱动组(driver),建立正向抑制消减 杂交文库,随机挑选180个阳性克隆,经过测序、去劣、去冗余、序列比对,有 113个 EST 与数据库中的已知序列具 有同源性,最终获得10个差异表达基因。 采用RT鄄PCR技术对10个差异表达基因进行验证,其中有1个基因在不 亲和性杂交的雌蕊中表达上调、7个基因表达下调、2个基因无明显变化。 对差异表达基因进行功能注释及分类, 差异表达基因主要集中于信号转导(包括丝氨酸/ 苏氨酸蛋白磷酸酶PP2A鄄3、钙依赖蛋白激酶CDPK、小G结合蛋 白)、抗逆防御(包括分子伴侣(clpB)、过氧化氢酶CAT2)、转运(包括质膜ATPase、焦磷酸酶质子泵)、蛋白命运(包 括60S核糖体蛋白)等功能类别。 据此推测,在东方百合伊山丹组(系)间不亲合性杂交育种过程中,可能引起雌蕊 与花粉管信号交流异常、物质转运能力减弱和雌蕊耐受逆境能力降低,从而导致杂交不亲和性。 关键词:百合;杂交不亲和;抑制消减杂交;雌蕊差异表达基因 鄄鄄 鄄鄄 鄄鄄 中图分类号:S603郾6摇 摇 文献标志码:A摇 摇 文章编号:1000 1522(2017)02 0082 10 1 1 1,2 1,2 WANGJie ;JIA Yue鄄hui ;ZHANG Ke鄄zhong ;CUI Jin鄄teng .Analysis of different expression genes between cross鄄compatibility and cross鄄incompatibility within pistils ofLilium spp. Journal of 鄄鄄 Beijing Forestry University(2017)39(2)82 91 [Ch,52 ref.] 1Landscape Architecture College,Beijing University of Agriculture,Beijing,102206,P.R.China; 2 Beijing Laboratory of Urban and Rural Ecological Environment,Beijing,102206,P.R.China. The hybridization of Lilium Oriental hybrids