产氢系统中的产氢产乙酸菌群强化及同型产乙酸菌群抑制-微生物学专业论文.docxVIP

Classified Index: X703 U.D.C:614 Dissertation for the Master Degree in Science ENHANCEMENT OF HYDROGEN-PRODUCING ACETOGENS AND INHIBITION OF HOMOACETOGENS IN FERMENTATIVE HYDROGEN PRODUCTION SYSTEM Candidate： Su xiaoyu Supervisor： Prof. Li Jianzheng Academic Degree Applied for： Master of Science Speciality： Microbiology Affiliation： School of Muni. Env. Eng. Date of Defence： Dec. 2011 Degree-Conferring-Institution： Harbin Institute of Technology 哈尔滨工业大学理学硕士学位论文 哈尔滨工业大学理学硕士学位论文 - - I - 摘 要 目前，生物质的发酵法制氢技术均是基于产酸发酵菌群对有机物的产酸发 酵产氢原理，由于有机物的降解程度较低，基质的氢气转化率很低，大部分氢 仍然被固定在液相发酵产物中。而产氢产乙酸细菌，能够降解产酸发酵菌产生 的乙醇和有机会挥发酸（VFAs）等为乙酸、CO2 和 H2。因此，发酵产氢系统中 产氢产乙酸菌群的功能强化，将有效提高单位基质的氢气转化率。另一方面， 一定条件下，耗氢的同型产乙酸菌群也可能存在于发酵产氢系统中，其耗氢作 用无疑会降低发酵产氢系统的产氢效能。本论文借助 2 套连续流搅拌槽式反应 器（CSTR）的调控运行，对如何强化发酵产氢系统中的产氢产乙酸菌群的功能 作用及抑制同型产乙酸菌群活性进行了探讨。 本研究以前期运行的两套 CSTR（Ⅰ型和Ⅱ型）甲烷发酵系统为基础，通 过调节 pH 值和投入产甲烷细菌抑制剂两种方法，将产甲烷菌群逐渐从反应系 统中淘汰，向产酸发酵系统转化并同时富集产氢产乙酸细菌。试验结果表明， 将系统（Ⅰ型 CSTR）pH 由 6.5~7.2 逐渐降低为 4.0~5.0，可成功淘汰系统中的 产甲烷菌，但并未富集到足量的产氢产乙酸菌；通过 10 mmol/L 的二溴乙烷磺 酸钠（BES）的连续投加（Ⅱ型 CSTR），不仅系统中的产甲烷作用被彻底抑制， 同时也富集到了足量的产氢产乙酸菌群，但发酵系统的产氢能力低下，发酵气 中的氢气含量平均仅为 1.5%，分析认为，系统中很可能存在大量耗氢的同型产 乙酸菌。 在验证Ⅱ型 CSTR 系统存在同型产乙酸菌的基础上，通过间歇试验和分子 生物学试验，确定了同型产乙酸菌抑制剂为氯仿，最佳抑制剂量为 0.2%（v/v）。 Ⅱ型 CSTR 系统在连续投加抑制剂氯仿后，其同型产乙酸作用受到显著抑制， 系统的产氢能力提高了 9 倍。为强化系统中的产氢产乙酸作用，进行了产氢产 乙酸优势菌群的选育工作，以Ⅱ型 CSTR 的活性污泥为出发菌群，通过初步富 集和四次传代强化富集，选育到一个产氢产乙酸优势菌群 SC4，该菌群不仅可 以利用葡萄糖发酵产氢，还可以利用丙酸和丁酸产氢，葡萄糖的氢气转化率达 到了 2.55 mol H2/mol G。 关键词：生物制氢；产酸发酵；产氢产乙酸；优势菌群；联合发酵 - - II - Abstract The presented fermentative hydrogen-producing processes used acidogenic fermentation of biomass as the theoretical basis. The specific hydrogen production rate of the biomass was low because moust of the hydrogen were still fixed in the liquid fermentative producets, such as ethanol and volatile fatty acids. Fortunately, hydrogen-producing acetogens in anaerobic flora can translate ethanol and volatile fatty acids to acetic acid while more hydrogen produced. Thus, a new fermentative hydrogen-producing process was suggested in this thesis, whi