产妇子宫平滑肌大电导钙激活钾通道(BKCa)表达水平变化及其与小窝蛋白相互作用和产后出血发病的关系-妇产科学(围产医学)专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 3 产妇子宫平滑肌大电导钙激活钾通道（BKCa）表达水平变化及 其与小窝蛋白相互作用和产后出血发病的关系 中 文 摘 要 目 的 研究产后出血产妇子宫平滑肌大电导钙激活钾通道表达及其与小窝蛋白相 互作用的变化，探讨 BKCa 通道的 α、β 亚基及其 α 亚基与小窝蛋白-1、小窝蛋 白-2 的相互作用在宫缩乏力性产后出血发病中的作用。 方 法 选择2009年10月—2011年02月住福建省妇幼保健院产科，行子宫下段剖宫产 产妇60例，分为宫缩乏力性产后出血组（研究组，n=30）和宫缩正常无产后出血 组（对照组，n=30）。 采用肌条等长张力测定实验测定产妇子宫平滑肌收缩频率、幅度及收缩活动 力（收缩活动力=频率×幅度）；应用免疫印迹法（Western blot）测定产妇子宫 平滑肌BKCa通道α、β亚基蛋白表达水平；应用实时荧光定量聚合酶链反应 （real-time RT-PCR）测定产妇子宫平滑肌BKCa通道α、β亚基mRNA表达水平。 采用免疫荧光双染法及激光共聚焦显微镜观察产妇子宫平滑肌BKCa(α亚 基）与小窝蛋白-1、BKCa(α亚基）与小窝蛋白-2的共定位；采用免疫共沉淀法 （Co-IP）检测产妇子宫平滑肌BKCa(α亚基）与小窝蛋白-1、BKCa(α亚基）与小 窝蛋白-2的相互作用。 结 果 1. 研究组子宫平滑肌自发宫缩收缩频率、幅度及收缩活动力（收缩活动力=频率 ×幅度）均低于对照组（均P＜0.05）。 2. 研究组子宫平滑肌BKCa通道α、β亚基蛋白及其mRNA表达水平均高于对照组 （均P＜0.05）。 3. 两组子宫平滑肌BKCa通道α、β亚基蛋白及其mRNA表达水平均与收缩活动力 负相关。 4. 两组子宫平滑肌细胞均表达BKCa(α亚基）、小窝蛋白-1和小窝蛋白-2，其中 BKCa（α亚基）主要位于细胞膜表面，而小窝蛋白-1和小窝蛋白-2在细胞膜表 面和细胞质均有表达；且BKCa（α亚基）与小窝蛋白-1、BKCa(α亚基）与小 窝蛋白-2均能部分区域共表达于细胞膜。 5. 研究组子宫平滑肌BKCa（α亚基）-小窝蛋白-1和BKCa（α亚基）-小窝蛋白-2 复合物表达水平均高于对照组（均P＜0.05）。 6. 两组子宫平滑肌BKCa（α亚基）-小窝蛋白-1和BKCa（α亚基）-小窝蛋白-2复 合物表达水平均与收缩活动力负相关。 结论 1. 子宫平滑肌属于单个单位平滑肌，具有自动节律性，故即使在离体状态下子 宫平滑肌亦能产生自发性收缩。提示肌条等长张力实验应用于子宫平滑肌收 缩功能的研究领域具有可行性。 2. 宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌细胞BKCa通道α亚基和或β1亚基表达增 加可能是导致子宫肌张力降低的重要原因。 3. 子宫平滑肌组织BKCa通道α、β亚基表达升高可能与宫缩乏力性产后出血的发 病有关。 4. 子宫平滑肌细胞中存在BKCa(α亚基）、小窝蛋白-1、小窝蛋白-2，且BKCa（α 亚基）与小窝蛋白-1、BKCa(α亚基）与小窝蛋白-2均能部分区域共定位。提 示小窝蛋白可能参与调节BKCa通道表达。 5. 宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌细胞 BKCa（α 亚基）-小窝蛋白-1 复合 物和或 BKCa（α 亚基）-小窝蛋白-2 复合物形成增加可能是导致子宫肌张力 降低的重要原因。 6. 小窝蛋白可能通过与BKCa（α亚基）相互作用参与调节BKCa通道表达，从而 介导宫缩乏力性产后出血的发生。 关键词 产后出血 宫缩乏力 大电导钙激活钾通道 小窝蛋白 收缩活动力 Expression and Significance of Large Conductance Ca2+ Activated K+ Channel and Its Relationship with Caveolin in Myometrium in Postpartum Hemorrhage Abstract Objective The purpose of this study was to detect the expression of large conductance Ca2+ activated K+ channel(BKCa) and its relationship with caveolin in myometrium of patients with postpartum hemorrhage(PPH), discuss their roles in the pathogenesis of PPH caused by uterine atony. Methods The levels of contractile frequency, amplitude and contraction