侧脑室注射共轭亚油酸（CLA）的外周效应研究-营养与食品卫生学专业论文.docxVIP

第四军医 第四军医大学硕士学位论文 PAGE PAGE 10 侧脑室注射共轭亚油酸（CLA）的 外周效应研究 硕士研究生：曹子鹏 导 师：王 枫 教授 （第四军医大学营养与食品卫生学教研室 710032） 中 文 摘 要 共轭亚油酸(conjugated linoleic acids, CLA)是一组天然存在的具有 18 个 碳原子，含有共轭双键的多不饱和脂肪酸，是必需脂肪酸-亚油酸(linoleic acid, LA)的异构体。近年来研究发现：CLA 有减轻肥胖、抗肿瘤、防止动脉粥样 硬化、提高机体免疫力、增加骨密度、促进生长等多种生理功能，其中减轻 肥胖的作用最受到研究者的重视。已有的研究显示，CLA 减轻肥胖的作用是 通过多途径、多因素发挥作用的，中枢神经系统（CNS）也是可能的途径之 一。中枢神经肽、神经递质和激素在体重调节中起着非常重要的角色。有关 营养物质的储存、饱腹感、对食物的口感等等都通过内分泌激素、营养代谢 的信号或是联络大脑与外周的神经通路与脑发生关系。本实验通过给 SD 大 鼠侧脑室注射 CLA，与非共轭的亚油酸（LA）进行比较，观察大鼠体重、 食欲 、 血 脂、 leptin 及 脑 组 织 NPY 、 AgRP 、 POMCmRNA 、肝脏 组 织 CPT-1mRNA 的表达，以证明 CLA 能够通过中枢神经系统调节全身的营养代 谢，为人们用 CLA 的食物预防和治疗肥胖提供理论基础。 实验方法 雄性成年 SD 大鼠，单笼饲养，正常饮食。实验分组：NS 对照组：脑室 内注射生理盐水（N.S.），0.5 μl/只；LA 对照组：脑室内注射亚油酸（LA）， 0.5 μl/只（150nmol）；CLA 对照组：脑室内注射共轭亚油酸（CLA），0.5μl/ 只（150nmol）。将大鼠麻醉后，固定于脑立体定向仪。坐标参考 Bregma 图 谱：前囟后 0.92mm，矢状缝旁开 1.4mm，脑表面下 3.3mm。牙科钻钻开颅 骨，暴露硬脑膜。微量注射器侧脑室注射 CLA0.5μl（150nmol）。分别于注射 后 2、4、8、12、24 小时减尾采血，取动物血清，用试剂盒法测定血清中血 脂水平，放射免疫法测 Leptin 浓度；分别于 2、4、8、14 天处死动物，取脏 器组织，称重，用 RT-PCR 法测脑组织中 NPY、AgRP、POMCmRNA 表达和 肝脏组织中 CPT-1mRNA 表达。 实验结果 1、侧脑室注射 CLA 对大鼠体重、食欲的影响：(1) 大鼠体重的变化： 侧脑室注射后，CLA 组动物体重持续降低，与 NS 对照组（第 4 天后）和 LA 对照组（第 14 天）相比有显著性差异（p＜0.05）。 (2)CLA 对摄食量的影响： 与注射生理盐水相比，注射 LA 和 CLA 都能够引起大鼠食欲的下降，但是与 LA 组相比（6 天），CLA 作用的时间更为持久（＞8 天）。（3）脑组织食欲肽 mRNA 表达的改变：侧脑室注射后第 2，4，8 天，CLA 注射组大鼠下丘脑 NPYmRNA 表达水平低于 LA 对照组和 NS 对照组（p＜0.05），与 NS 对照组 相比下降了大约 60%； CLA 注射组大鼠下丘脑 AgRP mRNA 表达水平低于 LA 对照组和 NS 对照组（p＜0.05），与 NS 对照组相比下降了大约 75%；CLA 注射组和 LA 对照组大鼠下丘脑 POMC mRNA 表达水平基本正常。 2、侧脑室注射 CLA 对大鼠脂肪代谢的影响：（1）对脂肪分布的影响： 与 LA 组和 NS 组相比，注射 CLA 组的皮下脂肪、睾周脂肪和脂体比均有显 著的改变（p＜0.05）；（2）大鼠血脂的改变：注射 CLA 后 2 小时血清甘油三 酯有显著的增高（p＜0.05）；注射 CLA2 小时左右血清总胆固醇有显著的降 低（p＜0.05）；注射 CLA4 小时左右血清高密度脂蛋白有显著的增高（p＜ 0.05）；侧脑室注射 CLA2 小时后血清瘦素开始升高，一直持续到 12 小时（p ＜0.05）。（3）对肝脏脂质沉积的影响：注射 CLA 后肝脏内甘油三酯含量减少； 肝脏 CPT-1mRNA 表达增高，与注射前相比有显著差异（p＜0.05）。 实验结论 1．侧脑室注射 CLA 后大鼠体重减轻，食欲下降； 2．CLA 抑制食欲的效应是通过影响 NPY 和 AgRPmRNA 表达发挥作用 的； 3．侧脑室注射 CLA 能够影响短期（48h）内血脂水平，能够减少肝脏组 织的脂质沉积； 4．CLA 影响脂质沉积的机制可能与增强 CPT-1 的表达有关。 5．中枢神经系统对机体食物摄取和能量代谢的影响非常复杂，脂肪酸在 其中扮演了重要角色。共轭亚油酸对中枢神经系统的影响有可能是通过多个