超氧化物歧化酶定向进化.PPTVIP

超氧化物歧化酶的定向进化 指导教师：张 今教授 DNA重组技术的发展出现了基因工程，定点突变技术的出现诞生了蛋白质工程，在基因工程和蛋白质工程的基础上，DNA shuffling技术的应用，出现了分子进化工程。1999年5月12日-15日 在美国由5000多名生物技术专家参加的会议上，定向进化被认为是达尔文进化论在分子水平的体现，是一场进化革命，引起各国科学界和企业界的高度重视。在实验室中模拟几百万年来发生在自然界中的漫长的进化过程，这种思想很快的得到了实验的支持和广泛应用。 基 本 原 理 属于蛋白质的非合理设计，它不需事先了解酶的空间结构和催化机制，人为地创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制（随机突变、基因重组和自然选择)，在体外改造酶基因，并定向选择（或筛选）出所需性质的突变酶。定向进化的关键在于“变”和“筛”的方法。 目前存在的问题 （1）天然酶在现存的工业条件下（例如在有机相、极端温度和pH）的稳定性较差或其催化水平很低； （2）天然酶在工程菌中的折叠效率较差或对蛋白酶敏感； （3）酶的催化范围需要扩大或减小； （4）需要创造具有新反应活性的酶； 研 究 策 略 酶法体外随机-定位诱变； 易错PCR技术为代表的无性进化； DNA shuffling为代表的有性进化； 基因家族之间的同源重组； 外显子改组； 模