细胞培养必备重点知识.pptVIP

细胞培养技术 Tissue culture 细胞培养 cell culture 是从体内取出组织的单个细胞或单一细胞群模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定营养条件下，使之生存和生长并保持细胞特性，为细胞培养。 各种液体要专人配制，并保证做到按规程行事；制备浓度精确、灭菌可靠。所有制备好的溶液和试剂瓶上都要有标签，注上名称、浓度、消毒与否和制备日期。 培养用品要有固定的存放地点（培养用品与非培养用品存放分开；已消毒与未消毒品严格分开存放）， 目的：避免各种杂质混入细胞生存环境、防止微生物感染和细胞“污染”。 二、细胞生存条件及代谢 无污染环境 培养环境无毒和无菌是保证培养细胞生存的首要条件。 细胞被置于体外培养后，失去了对微生物和有毒物质的防御能力，一旦被污染或自身代谢物积累等，可导致细胞死亡。 适宜温度 人体细胞的适宜温度为36.5℃+0.5℃，偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至死亡。 培养细胞对低温的耐受力比对高温强。 温度不低于0时，对细胞代谢虽有影响，但并无伤害作用； 对培养液中加一定量的保护剂（甘油或二甲基亚砜），封入安瓿中，冻存于液氮中，能长期储存，解冻后细胞复苏，仍能继续增殖生长，细胞生物性状不受任何影响，成为保存细胞最主要的手段。 气体和pH值 O2参与三羧酸循环，产生能量供给细胞生长、增殖和合成各种所需成分。多数细胞缺氧不能生存。 开