分子克隆技术常用工具酶.PPTVIP

聚合反应的特点： 1、聚合反应具有方向性: 5’ ? 3’ ? 2、DNA 聚合酶不能催化两个游离的脱氧核苷酸聚合，只能在一段寡核苷酸的 3- OH 逐个添加脱氧核苷酸，使核苷酸链不断延长。 5’ 5’ 引物 2）核酸外切酶活性 5’ A G C T T C A G G A T A 3’ | | | | | | | | | | | 3’ T C G A A G T C C T A G 5’ 5’ A G C T T C A G G A T A ? 3’ | | | | | | | | | | | 3’ T C G A A G T C C T A G C G A C 5’ ? 3’? ? 5’?外切酶活性 5’? ? 3’?外切酶活性 能切除突变的 DNA片段 能辨认错配的碱基对，并将其水解 A C 2 应用 1)切口移位法标记DNA 在DNase的作用基础上产生链内切口，应用此酶的5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切