实时荧光定量PCR检测转基因阿尔茨海默病小鼠脑组织中.PDF

·262 · doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2013.02.22 J South Med Univ, 2013, 33(2): 262-266 基础研究 实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR 检测转基因阿尔茨海默病小鼠脑组织中检测转基因阿尔茨海默病小鼠脑组织中 miRNAsmiRNAs 的差异表的差异表达达 田 密，丁 宇，侯德仁，邓炎尧，李 维，奉夏露 中南大学湘雅三医院神经内科，湖南 长沙 410013 摘要：目的 通过实时荧光定量PCR 方法检测APPswe/PS △E9 双转基因小鼠和对照小鼠脑组织中miRNA- 135a-5p、 miRNA- 135a-2-3p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p 和miR-669f-3p 的表达。方法选取6 月龄大小的APPswe/PS △E9 双转基 因小鼠为实验组，同月龄同种系的野生型小鼠C57 为对照组，分别提取其脑组织总miRNA ，应用实时荧光定量PCR 方法检测两 组小鼠脑组织中miRNA- 135a-5p、miRNA- 135a-2-3p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p 和miR-669f-3p 的表达。结果上述5 种 miRNAs 在实验组与对照组小鼠中的相对表达量分别为0.73±0.27、1.08±0.58 ，2.47±6.15、1.65±0.67 ，0.72±0.14、1.31±0.73 ，0.57± 0.34、1.06 ± 0.35 ，0.63 ± 0.26、1.02 ± 0.18。其中有统计学意义的是miRNA- 135a-5p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p 和 miR-669f-3p （P≤0.05）。结论miRNA- 135a-5p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p 和miR-669f-3p 在APPswe/PS △E9 双转基因 小鼠中有差异表达，可能在阿尔茨海默病的发病过程中起着重要作用。 关键词：阿尔茨海默病；转基因阿尔茨海默病小鼠；miRNA ；实时荧光定量PCR Real-time PCR for detecting differential expressions of microRNAs in the brain of a transgenic mouse model of Alzheimers disease TIAN Mi, DING Yu, HOU Deren, DENG Yanyao, LI Wei, FENG Xialu Department of Neurology, Third Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410013, China Abstract: Objective To detect the expression of miRNA-135a-5p, miRNA-135a-2-3p, miRNA-298-5p, miRNA-466b-3p and miR-669f-3p in the brain tissue of the APPswe/PS △E9 double transgenic mouse model of Alzhaimers disease using real-time PCR. Methods Six-month-old APPswe/PS △E9 double transgenic mice and wild-type C57 mice of the same species were examined for the expressions of miRNA-135a-5p, miRNA-135a-2-3p, miRNA-298-5p, miRNA-466b-3p and miR-669f-3p in the brain tissue using real-time PCR. Results The relative expression levels of the 5 miRNAs in the transgenic versus the wild-type mice were 0.73±0.27 vs 1.08±0.58, 2.47±6.15 vs 1.65±0.67, 0.72±0