紫外可见分光光度计使用2017.pdfVIP

NORTHWEST UNIVERSITY 仪器分析—— 紫外-可见分光光度计的使用 UVPROBE 2010-03 hlguo@new.edu.cn UV-1700 一、仪器的结构示意图及分析过程 ① 光源 ② 分光系统 ③ 样品池 ④ 检测器 光源→单色器→样品池→检测器→记录仪 1.光源 要求：提供紫外或可见连续辐 射（具有足够强度）有良好的稳定性 和足够的使用寿命。 ①.可见光源 钨灯作为光源，其 辐射波长范围在320～1000 nm。 ②.紫外光源 氢、氘灯。发射 185～400 nm的连续光谱。 2. 单色器 2. 单色器 把复合光分离成很窄的谱带。单 色器一般由色散元件和狭缝组成。色 散元件的作用是将光源的连续光谱色 散为单色光；狭缝的作用是调节光的 强度和让所需单色光通过。 常用的色散元件有棱镜和光栅两类。 1）棱镜：是利用不同波长的光有不同 的 折射率而使复合光分开的光学元件。有 立特鲁棱镜,考纽棱镜。石英棱镜可用于 紫外光区（可见光区，近红外区），玻 璃棱镜只用于可见光区。 2 ）光栅：它是利用光的衍射和干涉作用 使复合光色散。其特点是：色散波长范围 宽，可用于紫外，可见及近红外等光谱 区；具有良好而均匀一致的分辨能力，色 散近于线性，现代仪器多用光栅做色散元件。 狭缝是单色器的组成之一，对单色光的 纯度起着重要作用。狭缝宽度有两种表示 方法 ： ① 用狭缝的实际宽度表示，以 mm 为单位，一般为0-2 mm 。 ② 用通过出射狭缝的谱带宽度表示, 以 nm为单位, 如2nm，1nm ，0.5nm及 0.2nm等。此表示方法能直接了解单色光 的好坏，狭缝越窄，单色光越纯；测得的 吸收峰越尖锐，但光的强度减弱，影响测 定灵敏度。 3. 样品池 吸收池主要有石英池和玻璃池两种。 在紫外区须采用石英池，可见区一般 用玻璃池。常用吸收池光程长1cm。 4. 检测器 利用光电效应将透过吸收池的光 信号变成可测的电信号，常用的有光 电池、光电管或光电倍增管。 5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪 器自动控制和结果处理。 可消除单光束受 参比池 光源强度的影响 不用空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束 单色光( λ和 λ)；以参比波长 λ处的吸光度A 作为 1 2 1 λ1 参比，来消除干扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂 试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精 密度等方面都比单波长法有所提高。 ΔA ＝A －A ＝ (ε －ε )b c λ2 λ1 λ2 λ1 两波长处测得的吸光度差值ΔA与待测组分浓度成 正比。 ε 和 ε 分别表示待测组分在 λ和 λ处的摩 λ1 λ2 1 2 尔吸光系数。 二、仪器的开机及通讯的建立 1 打开仪器电源、仪器自检 2 打开电脑，运行UVProbe软件 3 通讯的建立 a 设定单片机为——外部控制 b 点击软件中“连接”建立通讯 三、 UVProbe 的使用 UVProbe 四大模块 光度模块－用的最多的模块，用来定量 光谱模块－定性 动力学模块－做化学