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研平面色谱
* * 第十八章 平面色谱法 平面色谱法(plane chromatography)是在平面上进行分离的一种色谱方法。 第一节 平面色谱法的分类及原理 第二节 薄层色谱法 第三节 纸色谱法 第一节 平面色谱法的分类和原理 一、分类: 1、薄层色谱法 2、纸色谱法 3、薄层电泳法 二、平面色谱法参数: (一) 定性参数: 1、比移值(retardation facter;Rf):是溶质移动距离与流动相移动距离之比。 L0 L1 L2 A B 前沿 原点 展开溶剂 2、相对比移值(Rr) (二)相平衡参数 K、к与Rf 值的关系 (三)面效参数: 1、理论塔板数(number of theoretical plate; n): 2、塔板高度(height of theoretical plate; H): (四)分离参数: 1、分离度(resolution; R): d A B d W1 W2 X F 平面色谱分离度的示意图 2、分离数:SN 定义:相邻斑点分离度为1.177时,在Rf=0 和Rf=1两种斑点之间能容纳的色谱斑点数。(一板为10, 高效可达20) 第二节 薄层色谱法 (TLC) 特点:1、快。2、分离能力强,直观。3、预处理简单对样基本无限制.4、上样量大。5、简单、易操作。 一、薄层色谱法 的主要类型 (一)吸附薄层色谱法 固定相为吸附剂的薄层色谱法 (二)分配薄层色谱法 各组份的K在固定相与流动相中不等 二、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂 (一)吸附剂 1、硅胶 2、氧化铝 表 硅胶的活度与含水量的关系 15 Ⅴ 38 10 Ⅳ 25 6 Ⅲ 15 3 Ⅱ 5 0 Ⅰ 0 氧化铝含水量% 活性级 硅胶含水量% (二)展开剂 常用溶剂按极性由强到弱的顺序水>酸 >吡啶>甲醇>乙醇 >正丙醇 > 丙酮 >乙酸乙酯 >乙醚 > 氯仿 …… 四氯化碳 >环己烷 >石油醚 三、薄层色谱操作方法 (一)薄层板的制备 (二)点样 (三)展开(多种展开方式) (四)斑点确定 1、有色 2、无色 ㈠斑点有荧光——紫外光照射 ㈡斑点无荧光 ①板有荧光 ②显色:通用(碘、硫酸乙醇),专属
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