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实验一、生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质 的鉴定; 一、可溶性还原糖的鉴定 1.还原性糖与非还原性糖： (1).还原性糖: (2).非还原性糖： 2.鉴定试剂： 甲液： 乙液： 葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、乳糖。 淀粉、纤维素、蔗糖、糖原。 斐林试剂 由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 质量浓度为0.05g／mL的CuSO4溶液 水浴加热 3、反应原理： 还原糖 + 斐林试剂 → 砖红色沉淀 4、溶液的颜色变化： 先混合再加入糖中（ NaOH +CuSO4） 现配现用 甲液和乙液等量混合均匀后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。 Cu(OH)2与加入的葡萄糖在水浴加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，葡萄糖本身被氧化成葡萄糖酸。 浅蓝色—棕色—砖红色（沉淀）。 50—65℃ 加热2分钟 2.实验流程 还原糖检测实验的实验结果 二、蛋白质的鉴定 1、鉴定试剂： A液： B液： 蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色 先加NaOH 液于样液中， 再加CuSO4 液于样液中 2、反应原理：蛋白质中的肽键在碱性溶液中与极稀的CuSO4反应，生成紫色的物质 双缩脲试剂 由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 质量浓度为0.01g／mL的CuSO4溶液 3、蛋白质的鉴定过程 蛋白质检测实验的实验结果 辨析比较 斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 不 同 点 使用方法 甲液和乙液混合均匀后方可使用，且现配现用 使用时先加A液再 加B液 呈现反应条件 需水浴加热 不需加热即可反应 反应原理 还原糖中的醛基被 Cu（OH）2 氧化, Cu（OH）2被还原为Cu2O 具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物 颜色 砖红色 紫色 浓度 乙液CuSO4浓度为 0.05 g/mL B液CuSO4浓度为 0.01 g/mL 相同点 都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度都是0.1 g/mL 三、脂肪的鉴定 1．试剂： 2．鉴定脂肪的实验材料 最好选择富含脂肪的种子，如花生种子（取其子叶）。 苏丹III或苏丹IV 3、脂肪的鉴定 取材：花生种子浸泡3～4 h，将子叶削成薄片 观察：在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒 然后用高倍镜观察 结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色 ①取最理想的薄片 ②在薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染色 2～3 min ③去浮色 ④制成临时装片 制片 1—2滴体积分数为50%的酒精 脂肪检测实验的实验结果 四、淀粉的检测 1、材料：淀粉含量较高的器官或组织，如马铃薯 2、流程： （1）向试管内注入2ml待测组织样液 （2）向试管内滴加2滴碘液，摇均 3、颜色反应： 蓝色 易错分析 对“检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质” 实验掌握不到位 1.还原糖鉴定实验材料要求 （1）浅色：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材 料。 （2）还原糖含量高：不能用马铃薯（含淀粉）、 甘蔗、甜菜（含蔗糖）。 3.唯一需要显微镜——脂肪鉴定。 4.记准混合后加入——斐林试剂；分别加入——双缩脲试剂（先加A液，后加B液，且B液不能过量）。两者成分相同，但CuSO4的浓度不同，所以不能混用。 5.非还原糖（如蔗糖）+斐林试剂 现象不是无色而是浅蓝色［Cu（OH）2的颜色］。 训练 1.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是 A.用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B.脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C.鉴定还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 D.用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用 B 2.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是 A.只有脂肪的鉴定需要使用显微镜 B.用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热 C.使用斐林试剂最好是现配现用 D.在还原糖的鉴定中，可用酒精灯直接加热产生 砖红色沉淀 D