卷心菜中过氧物酶热稳定性的初步研究.docVIP

实验一 卷心菜中过氧化物酶热稳定性的初步研究 实验原理 果蔬中的过氧化物酶（peroxidase）往往具有较高的热稳定性，对果蔬进行热烫处理时，常以过氧化物酶是否失活作为热烫是否充分的标准。许多研究表明果蔬中的过氧化物酶有热稳定和热不稳定两部分。这两部分的比例取决于果蔬的品种和热烫处理的温度。 过氧化物酶催化的典型反应为：H2O2＋AH2→A＋2H2O。 AH2是无色的还原性化合物，如果它经过氧化转变成有色的A，那么反应体系在特定波长下的吸光值就会随反应进行而增加。因此，可以用分光光度法测定过氧化物酶的活力。 试剂和仪器 试剂：0.05mol/L磷酸盐缓冲液pH7.0，含1.0mol/L NaCl(缓冲液Ⅰ)、0.1mol/L磷酸盐缓冲液pH7.0(缓冲液Ⅱ)、1%邻苯二胺-乙醇溶液、0.3%过氧化氢溶液 仪器：组织捣碎机、抽滤装置、水浴锅、721分光光度计（含比色皿）、秒表、常规玻璃仪器 实验步骤 从卷心菜中提取过氧化物酶 125g卷心菜＋125mL缓冲液Ⅰ ↓ 均质（20000rpm，2min） 匀浆 ↓ 抽滤 液体 ↓ 离心（