某肝明乐胶囊对化学性肝损伤有辅助保护的作用动物试验的报告.docVIP

某肝明乐胶囊对化学性肝损伤有辅助保护的作用动物试验的报告 　　【摘 要】目的 探讨某肝明乐胶囊对化学性肝损伤的辅助保护作用。方法 雌性SD大鼠随机分为五组，每组10只，试验设200mg/kg?BW、600mg/kg?BW、1200mg/kg?BW三个剂量组（分别相当于人体每日推荐量的5、15、30倍），分别量取10g、30g、60g样品，依次加蒸馏水至500ml混匀备用，冰箱保存，用完再配。另设蒸馏水对照组和50%乙醇模型对照组。采用酒精肝损伤模型法，三个剂量组给予不同剂量的受试物，阴性对照组和模型对照组给予蒸馏水，按10ml/kg?BW每天经口灌胃一次，连续给予30天，每周称两次体重，以此调整给药量。试验结束时将模型对照组和三个剂量组一次经口灌胃给予50%无水乙醇，剂量为14ml/kg?BW，阴性对照组给予同体积的蒸馏水，禁食16h后处死动物取肝脏称重，计算脏体比，并用肝脏进行生化指标检测及组织病理学检查。结果 连续30天经口灌胃给予雄性SD大鼠后，可见动物生长发育正常；在酒精性肝损伤模型建立的基础上，能显著降低低、高剂量组大鼠肝匀浆中的过氧化脂质降解产物丙二醛含量（P0.05）；组织病理学检查结果为阳性。结论 某肝明乐胶囊对雄性昆明种大鼠具有酒精性肝损伤辅助保护作用。 　　【关键词】某肝明乐胶囊；辅助保护作用 　　1材料和方法 　　1.1样品：某肝明乐胶囊，系棕色液体。人体每日推荐量为2.4g/60kg?BW。用蒸馏水作溶剂配制受试物溶液。 　　1.2无水乙醇：分析纯，由某化学试剂厂生产，批号 　　1.3实验动物：SD大鼠50只，体重160-200g，生产许可证号为SCXK（川）2008-24.SPF级。实验动物房使用许可证号为SYXK（川）2011-043.屏障系统，温度为20-25℃，相对湿度40-70%。 　　1.4试验分组及剂量设计：将雌性SD大鼠随机分为五组，每组10只，试验设200mg/kg?BW、600mg/kg?BW、1200mg/kg?BW三个剂量组（分别相当于人体每日推荐量的5、15、30倍），分别量取10g、30g、60g样品，依次加蒸馏水至500ml混匀备用，冰箱保存，用完再配。另设蒸馏水对照组和50%乙醇模型对照组。用乙醇（分析纯）造成肝损伤模型，乙醇浓度为50%（以蒸馏水稀释），灌胃量14ml/kg?BW（折合乙醇的剂量为7000mg/kg?BW）。 　　1.5 试验方法：采用酒精肝损伤模型法，三个剂量组给予不同剂量的受试物，阴性对照组和模型对照组给予蒸馏水，按10ml/kg?BW每天经口灌胃一次，连续给予30天，每周称两次体重，以此调整给药量。试验结束时将模型对照组和三个剂量组一次经口灌胃给予50%无水乙醇，剂量为14ml/kg?BW，阴性对照组给予同体积的蒸馏水，禁食16h后处死动物取肝脏称重，计算脏体比，并用肝脏进行生化指标检测及组织病理学检查。 　　2检测指标 　　2.1肝匀浆中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）及甘油三酯（TG）的测定：用MDA和GSH测定试剂盒，UV1100分光光度计测定；用TG测定试剂盒和AU-400全自动生化分析仪进行测定。 　　2.2肝脏称重及脏器系数的计算 　　2.3肝脏组织病理学诊断标准 　　2.3.1病理观察材料：从动物肝左叶中部做横切面取材、切片、染色、镜下观察脂滴在肝脏中的分布、范围和面积。 　　2.3.2病理观察方法：每例动物肝组织用40倍物镜连续观察组织切片，根据阳性细胞多少和分布的范围，按0、1、2、3、4分进行评分。将所得分数的平均值作为该例肝组织的脂肪染色评分。 　　2.3.3病理诊断标准：病理组织学观察以肝细胞脂滴染色作为观察指标，并根据病理改变程度“0”、“1”、“2”、“3”、“4”量化，进行肝损伤程度的评价。 　　2.3.4 肝细胞脂肪染色共分为五级：肝细胞内脂滴散在、稀少，计0分；含脂滴的肝细胞不超过1/4，计1分；含脂滴的肝细胞不超过1/2，计2分；含脂滴的肝细胞不超过3/4，计3分；肝组织几乎被脂滴代替，计4分。 　　2.4试验数据统计：试验数据统计采用SPSS 11.0 for windows软件包处理。对照组与各剂量组的数据经方差齐性检验，方差齐，进行方差分析，如P值小于0.05，则用Dunnett法进行两两比较；若方差不齐，则进行数据转换，仍不齐，改用秩和检验，如P值小于0.05，则用Dunnett，s T3法进行两两比较。阴性对照组与模型对照组数据则采用T检验。 　　3试验结果 　　3.1某肝明乐胶囊对大鼠体重、肝重、肝体比的影响 　　由表1可见，某肝明乐胶囊各剂量组大鼠的初始体重与阴性对照组及模型对照组比较，方差齐（P 0.05），