白光下拟南芥隐花素双突变体及其野生型的蛋白质组学比较分析＊.PDF

498 　 19 　5 　2009 5 白光下拟南芥隐花素双突变体及其 野生型的蛋白质组学比较分析＊ 1 ＊＊ 1 ＊＊ 2 2 2 2 2 杨粤军 　周桂凤 　李　旭 　李　彦 　萧小鹃 　郭新红 　刘选明 1., 410081;2., , 410082 摘要　　隐花素是植物的蓝光受体, 在植物中 节多种光形态建成, 包括抑制下胚轴的伸长、 子 叶的伸展和 节植物的开花时间等, 但隐花素依赖蓝光 节光形态建成的分子机制仍然不清楚. 采用双向凝胶电泳对生长在白光下的拟南芥隐花素双突变体及野生型的幼苗全蛋白进行分离, 通 过考马斯亮蓝染色, 获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.选取了55 个差异蛋白质点采用 MA LDI- OF- OF-MS 进行肽质谱指纹图分析, 最终有33 个蛋白质点得到了可靠鉴定.其中在 cry 1cry2 中相对于野生型下 的有9 个蛋白, 其他蛋白均表现为上 .这些在白光处理下差异表 达的蛋白质主要是参与碳水化合物代谢、 能量代谢、 细胞组织结构、 抵抗压力和解毒、 蛋白质的 折叠和细胞壁的形成等功能, 而且亚细胞定位主要是在叶绿体和线粒体.对其中5 个蛋白质点的 基因进行了半定量R -PCR 分析, 发现这几个蛋白质点的表达与基因的表达基本 一致.这些分析 结果表明光控制拟南芥的发育是通过共 节许多相关基因的表达而实现的. 关键 　　　　　RT-P CR 　　, 500nm) (320—400 nm). 、 . FAD M HF, , [ 1—3] .3 ., :CRY1、 CRY2 [4—7] .CRY3 , , DNA . , ., , , , , , 、 、 、 , 、 、 、 、 . , , . 、 , [8] (400— . 　2008-09-20 , 2008-10-27 　 ＊ (、 (:06FJ3152, 08FJ4211) (:08B049) E-mail:yangyuejun2008@126.com 　＊＊ 　19 　5 　2009 5 499 , , cry1cry2 col-4 , 10%0.3%D , , -20 ℃, 4 ℃, 16000 r/min R -PCR , cry1cry2 1h., 0.3%D , . , 4 ℃, 16000r/min 30min., 1 . 1 　材料和方法 -80 ℃. 1.1 　仪器与试剂 1.3 　双向凝胶电泳 Ettan M IPGphor M , EPS601 500μg (7mol/L , Ettan M DAL six , Multi- , 2mol/