滴度以出现明显抗原抗体反应现象-浙江大学.PDF

Immunodiagnosis 陈建忠 浙江大学免疫学研究所 chenjianzhong@zju.edu.cn 免疫学检测技术 • 利用免疫学原理来检测抗原、免疫分子（抗体 、补体、细胞因子和粘附分子等）及免疫细胞 等免疫学研究对象的实验过程。 一、抗原抗体的检测 二、免疫细胞功能的检测 Ag-Ab reaction A Agglutination g - A b precipitation R e a c t Complement Fixation i o n immunolabeling Cellular Function Detection C FACS e l l u l a MTT r f u n c t Cytokine i o n In vivo detection 抗原抗体反应 抗原抗体反应的基本原理： 特异性 抗原抗体反应 抗原抗体反应的类型 一、凝集试验 二、沉淀试验 三、补体结合反应 四、免疫标记技术 实验一：凝集反应和吞噬试验 （一）凝集试验 1、直接凝集反应（ABO血型鉴定） 2、间接凝集反应（类风湿因子测定） 3、金黄色葡萄球菌协同凝集试验 （二）吞噬试验 （示教）（310室） 1、中性粒细胞的吞噬作用（小吞噬） 2、巨噬细胞的吞噬作用（大吞噬） 凝集反应：原理 凝集反应：类型 凝集反应：ABO血型鉴定 凝集反应：ABO血型鉴定 实验步骤：（2人/组） 1、制备红细胞悬液。 2、加抗A或抗B。 3、加红细胞悬液。 4、结果观察。 凝集反应：血清类风湿因子检测 载体颗粒：RBC 可溶性抗原：IgG 致敏颗粒：吸附人IgG抗体的RBC 抗体：类风湿因子IgM 凝集反应：血清类风湿因子检测 9 10 1.稀释液 50μl 50 50 50 50 50 50 50 50ul + 50ul 2.待检血清 50ul （1：10） （Ab? ） 50ul 50 50 50 50 50 50 弃去50 Ab稀释度 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560 • 效价（滴度）：以出现明显抗原抗体反应现象（＋＋及以上）的最高稀 释度作为待检抗原（或抗体）的效价，可反应待检物含量。 1.稀释液 50μl 50 50 50 50 50 50 50 50ul +ve 2.待检血清 50