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红颊草莓茎尖快繁技术的研究 　　摘要：以“红颊”草莓匍匐茎茎尖为外植体进行组培快繁技术研究，试验表明：外植体诱导分化以MS+BA0.5~1.0 mg/L +IBA0.05 mg/L或MS+BA0.5~1.0 mg/L培养基为好，继代苗苗高小于2cm时接种到MS+ BA0.5+IBA0.03培养基增殖较好。生根培养基以1/2MS或1/2MS+活性炭生根效果好，生根率达95%以上。草莓组培生根苗移栽到珍珠岩5cm+泥头灰5cm +珍珠岩5cm夹层培养基质中炼苗成活率较高。 　　关键词：草莓；红颊；茎尖培养；组培快繁 　　 　　“红颊” 以章姬和幸香草莓为亲本杂交获得。因其植株基部红色，果实鲜红漂亮而得名。该品种生长势强、果大质优、丰产性好且耐贮运，深受广大草莓种植户的青睐。但目前草莓种苗主要通过匍匐茎繁殖和分株繁殖获得，种苗增殖速度较慢且易感病，直接影响生产质量。为能快速有效地生产、推广优质草莓种苗，我们对该品种进行了组培快繁技术研究，以期能为建立高效快速的“红颊”草莓无菌再生体系及优质草莓苗规模化生产提供一定的技术基础。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1材料 　　草莓组培外植体来自浙江省临海市农业局经作站高山草莓种苗繁育基地，无菌系诱导外植体用脱毒“红颊”草莓苗匍匐茎茎尖。 　　1.2方法 　　 　　 　　1.2.1 无菌材料获取及芽诱导。在6～7月份选晴好天气，采集生长健壮草莓匍匐茎茎尖作外植体。试验材料洗净，无菌条件下用75％酒精处理30秒，0.1％HgC12消毒8分钟，10%NaCl处理10分钟。无菌条件下剥去匍匐茎茎尖外苞叶，剥取0.2~0.3cm长短茎尖，每瓶1个茎尖外植体，每处理25瓶，接种到附加AgNO3及活性炭的各诱导培养基处理中培养。基本培养基为MS，琼脂8g/L，蔗糖20~30g/L，pH值为5.8。培养温度23~25℃、光强1500~2000Lx、光照时间为12小时/天条件下培养。1个诱导周期后观察诱导分化情况。 　　1.2.2无菌芽增殖。草莓无菌芽切成2株/丛，每瓶4丛，每处理10瓶，转入各增殖处理培养基培养，1个继代周期后，观察记录每处理增殖系数。 　　草莓丛芽按0.5~1cm、1~2cm和2~3cm不同苗高分别接种于相同继代培养基中，1个增殖周期后，观察记录各自的增殖倍率。 　　基本培养基及培养条件与诱导培养基相同。 　　1.2.3生根培养及炼苗。组培草莓苗增殖至一定数量时，选高3cm左右增殖苗切成单株，每瓶8小株，每处理10瓶，转入生根培养基各处理，生根培养20天后，观察记录处理生根状况。基本培养基及培养条件与诱导培养基相同。待根长成2cm左右长时，开始室外炼苗。 　　 　　2 结果与分析 　　 　　2.1不同激素配方对“红颊”草莓匍匐茎茎尖诱导分化的影响 　　灭菌外植体在不同BA、IBA、NAA浓度配比培养基中诱导培养25天后，统计各处理培养基中外植体萌芽率(不计污染)，结果见表1：当BA浓度小于1.0mg/L时，不论是添加IBA、NAA还是不加生长素，当生长素浓度不变时，培养基中外植体萌芽率均随着BA浓度的增加而提高，超过1.0mg/L浓度时，萌芽率反而下降，增至1.5 mg/L浓度时，芽诱导后期会出现玻璃化现象，不利于诱导芽生长及继续分化，所以草莓匍匐茎茎尖诱导时，培养基中BA浓度宜控制在1.0mg/L以内。当BA浓度不变时，生长素添加种类不同，芽诱导表现不同：添加NAA时，外植体萌发诱导过程中伴有明显的愈伤生长，容易与萌发芽体争夺养分而不利于诱导芽生长。综合考虑，培养基MS+BA 0.5~1.0 mg/L +IBA0.05 mg/L或MS+BA0.5~1.0 mg/L较适合“红颊”草莓匍匐茎茎尖诱导分化。 　　2.2不同激素配方对“红颊”草莓丛芽增殖的影响 　　将长势相当的草莓无菌芽切成2株/丛丛芽，每瓶4小丛，每处理10瓶分别转入不同激素配方继代培养基，诱导苗基部侧芽增殖，接种30天后，观察统计各继代培养基苗生长情况及增殖倍率。结果见表2：当IBA浓度保持不变时，BA在0.5~1.0mg/L范围内，草莓丛芽的增殖倍率随着BA浓度的增加先提高后下降，BA浓度增至1.0mg/L时，不但增殖倍率比0.5、0.8mg/L浓度低，而且增殖苗叶脆，有玻璃化生长趋势，这可能与诱导分化前期草莓丛芽芽体已部分累积生长调节剂相关，增殖过程中培养基BA浓度宜适当降低，控制在0.5mg/L左右。另外，在BA0.5+IBA0.03激素配比基础上，添加KT或GA均不利于“红颊”草莓丛芽的增殖。 　　2.3 增殖丛芽大小对“红颊”草莓丛芽增殖影响 　　长势相当，不同苗高的无菌芽接种在MS+BA0.5+IBA0.03继代培养基中，30天后统计记录各自的增殖倍